在本研究中，进行了为期9周的实验，以调查氨氮含量对团头鲂组织结构的慢性毒性。 我们将实验鱼暴露于五种不同的氨氮浓度中（0,5,10,15和20mg L -1总氨氮）。结果显示，暴露于各种浓度氨氮中的鱼会引起鳃和肝组织中的组织病理学改变。 此外，通过透射电子显微镜的形态学检查显示了鳃组织胞质的空泡化，线粒体损伤，异染色质增加以及鳃片的上皮细胞强烈脱落。这些结果表明了长期暴露于氨氮浓度> 5 mg L-1的环境下可以诱发鱼类氧化应激，并可能导致鱼对病原体感染的易感性增加。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验鱼的喂养试验2
1.2样品收集和化学分析2
1.3统计分析3
2结果与分析3
2.1慢性氨胁迫对腮和肝组织微观结构的影响3
2.1.1慢性氨胁迫对鳃组织微观结构的影响3
2.1.2慢性氨胁迫对肝组织微观结构的影响4
2.2慢性氨胁迫对腮组织超微观结构的影响4
3讨论5
3.1研究意义5
3.2研究结论6
致谢6
参考文献6
慢性氨氮胁迫对团头鲂幼鱼肝和腮组织结构的影响
引言
引言
氨是蛋白质分解代谢的最终产物，占鱼释放的含氮废物的一半以上[1]。氨也可以从几种来源进入水体：如污水，工业废物，农业径流和生物废物的分解[23]。 在水生环境中，氨积累是鱼类养殖的一个严重问题，特别是在再循环系统，水族箱和鱼塘中。在这些环境条件下，对水生生物的慢性毒性是不可避免的[4]，因为非电离氨可以沿着浓度梯度自由扩散到鳃膜上[5]，因此可能导致大脑能量代谢的损伤，且会损伤鱼体中的鳃，肝，肾，脾和甲状腺组织[6]。
氨以离子化（NH 4 +）和非离子化（NH 3）形式存在[7]。氨的毒性主要归因于未电离形式，并受环境参数如温度，pH，碱度，盐度和溶解氧水平的影响。在密集养鱼作业中，鱼类始终保持着高密度生活，因而水中可能会逐渐积累氨，特别是当水交换受到限制时[810]。众所周知，高氨 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072* 
浓度水平对鱼类生理上有害，并且可导致生长缓慢[1011]，以及对各种器官的损害[6]和免疫抑制[1213]。组织病理学生物标志物比生物化学或生理学生物标志物具有一些优点，例如样品收集和储存的容易性以及评估细胞或组织损伤特异性位点的可能性[14]。因此，确定物种经历由慢性氨氮胁迫引起的生理扰动和器官或组织水平变化的公差极限是非常重要的。
我们已经在许多物种中研究了急性氨的毒性[15]。相比之下，与急性毒性试验[16]相比，对淡水鱼长期或长期氨胁迫的影响的研究很少，尤其是中国团头鲂。团头鲂(Megalobrama amblycephala)是目前用于池塘和循环水产养殖最广泛栽培的淡水鱼，并且是一种相对敏感的物种，可用于研究对氨的应激反应[17]。本实验设计和进行于实验室，目的为确定慢性氨毒性对团头鲂生长性能，血液参数，抗氧化反应和幼年团头鲂组织结构的影响。最终我们的研究结果表明，通过长期接触氨诱导，团头鲂的应激反应不限于简单的生长抑制，而是伴随氧化应激，血浆参数效应的改变和肝与鳃的组织学的变化。
1 材料与方法
1.1实验鱼的喂养试验
将实验鱼（平均体重26.02±0.04g）随机分为15个池，每池25个鱼。饲喂试验技术和氨浓度的维持按照Benli等人所述的方法[6]。加入作为氨源的氯化铵（NH4Cl）至所需的最终氨浓度。最后，在使用张武肖等人的零控制方法之后[19]，氨浓度为5,10,15,20mg L1氨氮。所有用于研究动物的实验均根据欧盟理事会（2010/63 / EU）的指南进行。
表1 对照组和四个实验组中的总氨N（TAN;测量），未离子化氨（UIAN;计算），pH，溶解氧（DO）和温度。
项目
总氨氮浓度（mg L1）
0
5
10
15
20
TAN (mg L1)
0.041±0.03
5.15±0.03
10.21±0.04
15.28±0.04
20.34±0.06
UIAN (mg L1)
0.003±0.00
0.39±0.01
0.76±0.01
1.14±0.02
1.52±0.04
pH
7.86 ± 0.41
7.86 ± 0.41
7.86 ± 0.41
7.86 ± 0.41
7.86 ± 0.41
DO (mg L1)
5.48 ± 0.83
5.48 ± 0.83
5.48 ± 0.83
5.48 ± 0.83
5.48 ± 0.83
温度 (°C)
28.23 ± 0.79
28.23 ± 0.79
28.23 ± 0.79
28.23 ± 0.79
28.23 ± 0.79
注：值取平均值（SEM）给出。
1.2 样品收集和化学分析
试验结束时，在采样前将鱼饥饿24小时。并对来自每个罐的鱼进行计数和单独称重。 然后从每个罐中取出三条鱼用MS222麻醉，之后立即使用肝素化注射器从尾静脉收集血液样品。首先，将20μl血液样品用于血液学测定。收集剩余的血液并在4℃下以3,000×g离心10分钟以获得血浆，将其分离后在80℃下储存。在排出后，取出每条鱼的肝脏，将组织样品储存在80℃环境下直到进一步分析。将鳃和肝组织样品在Bouin溶液和2.5％戊二醛中固定，以用于组织学（光和电子显微镜）分析。
将肝样品在冰冷的磷酸盐缓冲液（1:10稀释）（磷酸盐缓冲液：0.064M，pH 7.4）中匀浆。将匀浆离心（3,000×g，10分钟，4℃），并将上清液的等分试样用于测量超氧化物歧化酶（SOD），过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）和丙二醛 MDA）。 最后使用试剂盒（南京建成机构，中国南京）测量肝脏样品中的酶活性[2021]。

原文链接：http://www.jxszl.com/nongxue/scyz/560787.html