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白藜芦醇对吉富罗非鱼血清组学的影响【字数:5733】

2024-02-24 17:09编辑: www.jxszl.com景先生毕设
为探究不同浓度白藜芦醇对吉富罗非鱼(GIFT tilapia, Oreochromis niloticus)血清组学的影响,在饲料中分别添加了白藜芦醇0、0.025、0.05、0.1g/kg(分别为对照组、低浓度组、高浓度组)喂养吉富罗非鱼幼鱼,于第15、30、45天取血清样品,对血清中差异表达基因进行了GO和KEGG富集分析。结果表明了添加白藜芦醇,吉富罗非鱼血清中细胞粘附分子(cell adhesion molecules (cams))和单纯疱疹感染(herpes simplex infection)表达基因明显升高,对Ca2+-ATPase activity、MDA activity、GSH activity和ATP content也有很明显的影响作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验材料 2
1.2实验方法 2
1.2.1 血清获取与处理2
1.2.2 cDNA文库建立及转录组测序3
1.2.3 用于载体构建和qPCR的引物序列3
1.2.4基因表达水平及基因差异表达分析3
1.2.5 差异表达基因的GO与KEGG富集分析3
2结果与分析3
2.1序列质量评估3
2.2白藜芦醇对差异基因表达的影响分析4
2.3差异基因的GO分析4
2.4白藜芦醇对免疫系统相关基因的影响5
2.5白藜芦醇对血清生理学指标影响5
2.6差异表达基因的KEGG分析6
3 讨论 7
致谢8
参考文献8
白藜芦醇对吉富罗非鱼血清组学的影响
引言
白藜芦醇作为天然的植物保健品[1],属于多酚类化合物,大量体外实验研究表明白藜芦醇具有极高的应用价值,生物学功能多样,比如植物雌激素样作用,预防癌症, 舒张和保护血管, 抑制COX2(环加氧酶2),增加肌肉的弯曲度与弹性,延缓衰老, 抑制HIV,抗自由基损伤 [2],白藜芦醇在糖尿病、心血管保护、抗炎 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ¥351916072
方面等等方面都具有独特作用。白藜芦醇在化妆品、保健品等方面应用广泛,但在动物生产领域的研究和应用还尚少,且将白藜芦醇作为饲料添加剂在水产动物中的研究也较少[1,3]。
在养殖罗非鱼所有品种中,吉富罗非鱼 (tilapia)是属于可以快速生长的一个品种[4]。但目前罗非鱼的养殖情况不容乐观,仅仅就养殖环节而言,集约化和高密度养殖模式在创造利润的同时造成养殖水体富营养化,随之而来的病害的爆发、用药量加大、各种药物残留问题,以至于影响人类健康。因此如何提升池塘养殖罗非鱼自身品质,提高国际市场竞争力,成为罗非鱼养殖产业一大阶段性目标。将白藜芦醇作为饲料添加剂用于罗非鱼养殖可能会成为一种有效措施。
69月份是罗非鱼快速生长的季节,关于白藜芦醇对吉富罗非鱼血清的炎症因子,免疫因子,组织学及细胞凋亡等方面的影响的研究已较为完善,但关于白藜芦醇对吉富罗非鱼血清中基因方面的变化的研究还较少。有研究表明,虎杖用于养殖池塘水质净化的效果明显,而白藜芦醇就是虎杖最主要的有效成分,它不仅具有抗菌抑菌作用,还能增强鱼类的免疫力[5]。如果将其当成饲料添加剂在养殖过程中加以应用,不仅可以发挥它净化水质的作用,还可以发挥它的多重生物学效应。我们同样能自葡萄、虎杖等含白藜芦醇植物内完成白藜芦醇提取,也可进行人工合成,获取来源上较为稳定。白藜芦醇在保健品和化妆品等其他方面应用广泛[6]也较为成熟。所以如果水产动物领域中有所进展,再实际生产投放上,前景十分可观。当前,罗非鱼病害发生机率比较高,养殖环境不佳,内需比较低靡,而全球罗非鱼市场中的竞争程度却在不断增大,罗非鱼产业遭受打击。当前,罗非鱼产业发展阶段性目标就在于全面着眼于罗非鱼品质提升,有效构建生态养殖模式。在养殖饲料添加剂选择方面,将白藜芦醇列为一种必选添加剂,既可一定程度上缓解水资源压力,又能对水体环境进行修复,减少鱼药使用,还可以增加渔民收入。
本课题摸索在饲料中添加白藜芦醇,通过观察信号转导、代谢途径(差异表达基因参与),血清中差异基因表达的变化,不同功能区表达,和基因转录组的变化,来研究白藜芦醇对鱼类生理功能的影响,对饲料添加剂采用白藜芦醇时的最佳配比进行全面分析、探索,以此为鱼业生产中白藜芦醇的功能发挥提供更多的理论依据与学术指导。
1.材料和方法
1.1试验材料
宜兴养殖基地(隶属中国水产科学研究院淡水渔业研究中心)提供本次研究用吉富罗非鱼分析样本。先用普通鱼用饲料喂食暂养一周,而后选取健康生长幼鱼 300 尾((47.8±3.6)g,(10.9±0.3) cm)。在每个处理每缸(300 L,100 cm×70 cm×70 cm)放置 12 尾吉富罗非鱼幼鱼,每个试验组作 2 个重复(N=108)。
表1给出的是鱼类养殖用基础饲料配方[7],设计 4 组不同 Res 含量添加量分别为0、0.025、0.05、0.1g/kg,用AD 这四个大写字母来表示四个组别。白藜芦醇(98%)购自西安通泽生物科技有限公司。粉碎所有饲料原材料,且用40目筛筛选,各种原材料称取适时、均匀混合,将不同量Res加入其中,生产沉水饲料(2 mm直径),自然晒干、存储(保存温度20℃)。
表1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础)
Table1 The component of feed
成分
含量(%)
小麦粉
18.4
18.4
18.4
18.4
豆粕
24
24
24
24
菜粕
27

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