芦丁（Rutin）作为黄酮类化合物在人类的心脑血管疾病以及反刍动物的泌乳中有较大的应用。但是芦丁在低等脊椎动物鱼类上的应用鲜有报道。本实验以吉富罗非鱼幼鱼为研究对象，在查阅吉富罗非鱼养殖等相关资料之后，为摸索芦丁的最适添加浓度，将吉富罗非鱼暂养一个月后，分为三个组，分别是0（对照组）、0.1、0.3 g/kg芦丁添加量，在第15、30、45天进行采样做血清指标的检测，检测指标为IgM、IFN-γ、IL-10、TNF-α、 IL-1β、IL-8。将检测结果用SPSS进行统计学分析，以期为吉富罗非鱼疾病的防控提供基础的理论数据。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract. 3
Key words 3
引言 3
1 材料与方法 4
1．1 实验材料 4
1．1．1 实验对象 4
1．1．2 实验用水 5
1．1．3 实验饲料 5
1．2 实验方法 5
1．2．1 动物饲养与取样 5
1．2．2 测定免疫因子 5
2 结果与分析 6
2．1 测量结果分析 6
2．2 实验结果 7
2．2.1 IgM 7
2．2.2 IFNγ 7
2．2.4 TNFα 8
2．2.5 IL1β 8
2．2.6 IL8 9
3 讨论 9
致谢 10
参考文献 11
饲料添加芦丁对吉富罗非鱼血清炎症因子的影响
水产养殖学 杨艳平
引言
引言
前期课题组采用中草药对池塘水质进行净化取得较好的效果，供选择的中草药品种有鱼腥草、虎杖、薄荷、夏枯草、水龙等。前期研究结果表明鱼腥草种植不仅具有净化水质的效果，还能显著提高罗非鱼的成活率，提高罗非鱼的免疫能力。鱼腥草主要含挥发油和黄酮类物质。而芦丁（Rutin）即为维生素P，又称芸香叶苷、芸香试、维生素、紫槲皮戒。广泛存在于自然界中，尤其是石南科和芸香科的植物，也是一种具有代表性的黄酮类化合物。芦丁结构上具有较 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
为丰富的官能团和完整的大π键共轭体系，使得它具有多种抗性活性，如抗氧化活性、抗自由基活性；还具有药物活性，如抗病毒活性等，可用于多种疾病的治疗[]。郭旭东等[]研究表明，芦丁能够提高奶牛的泌乳量，保持奶牛泌乳的品质，同时还可以降低奶牛血清中尿素氮的水平。此外，马溶等[]研究表明，芦丁对现代文明病如心脑血管疾病、糖尿病等都具有较强的缓解作用。王其仁、郑林[]用芦丁制作防晒霜，经实验证明，效果良好，并且由此提出了“绿色防晒”的概念。由此可见，芦丁在人们的生产生活中得到了较为广泛的应用。但是关于芦丁在水产养殖中的应用在国内外却鲜有报道。本课题想通过饲料中添加不同浓度的芦丁，通过免疫指标作为检测终点，摸索饲料中中草药有效成分的最适添加量。
鱼类属于同时具有非特异性免疫和特异性免疫的低等脊椎动物。鱼类的非特异性免疫是通过非特异模式来识别受体，即病菌毒素等。在鱼类的血液和组织中参与鱼类非特异免疫的细胞有吞噬细胞、细胞毒细胞、及树突状细胞等。参与鱼类非特异性的免疫因子有溶菌酶、抗菌肽、干扰素、白细胞介素等[]。在鱼类的特异性免疫中，主要产生特异性的免疫球蛋白进行特异性免疫。鱼类与哺乳动物一样，鱼类也是特异性免疫和非特异性免疫协同合作。抗原最初进入机体时存在一段时间的潜伏期，这时血清中基本上不存在或存在很少的免疫球蛋白，抗原进入鱼体以后,通过与体内巨噬细胞的胞饮或者吞噬作用,使得抗原被移送至肾和脾进行吸收、积累。抗原入侵鱼体的信息传递给淋巴细胞后，淋巴细胞增殖，从而形成抗体生成细胞，免疫血清中开始出现特异性，免疫球蛋白产生细胞在这期间充分发挥其功能随后，血清中量保持稳定时期，然后逐渐减少，直至再次有刺激源进入，才能再开始产生特异性。鱼类的免疫过程绝大部分都是在血清中进行，因此血清使研究鱼类免疫功能的良好材料。
免疫球蛋白( immunoglobulin，Ig)是鱼类免疫过程中的重要介质。是抗原刺激B淋巴细胞后分化成浆细胞后产生的一种抗体蛋白。在鱼类的免疫球蛋白中，IgM的含量最高，并且在免疫过程中起最重要作用[]。炎症发生之后，鱼体内的细胞因子有炎症抑制因子和炎症促进因子两类。在炎症抑制因子中，干扰素（Interferon）是脊椎动物体内的一种可溶性蛋白，是细胞因子中最先被发现的。干扰素可以分为三种类型：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。其中，Ⅱ型干扰素（Interferonγ，IFNγ）也被称为免疫干扰素，据研究表明，IFNγ除了具有抗病毒、抗肿瘤的功能外，还具有免疫调节功能[]。白细胞介素（Interleukin，IL）是由活化的淋巴细胞和单核巨噬细胞等细胞产生的可作用于淋巴细胞、巨噬细胞等的一类细胞因子，具有联络白细胞群的相互作用，信号的传递等功能。此外,IL还在细胞的活化、增殖和分化中起到重要的调节作用。在众多白细胞介素中，白细胞介素10（Interleukin10，IL10）主要作用有两方面，一是抑制单核巨噬细胞释放炎症因子，二是增强抗炎因子的释放。IL10与 IFNγ同属于炎症抑制因子，并且IL10是IFNγ的抑制因子[]。而在炎症促进因子中，以白细胞介素1β(Interleukin1β, IL1β)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor α, TNFα)为代表，前者通过刺激炎症和自身免疫病相关基因的表达，诱导相应效应蛋白的表达，在免疫调节及炎症进程中有着重要的作用；而后者可以导致肿瘤细胞坏死，并且对动物体的其他细胞基本不造成伤害。白细胞介素8（Interleukin10，IL8）作为免疫调节剂、免疫效应因子、造血细胞刺激剂、炎症反应的促进剂等角色在免疫过程中其重要的作用[]。
吉富罗非鱼(GIFT tilapia, Oreochromis niloticus)是由国际水生生物资源管理中心通过4个非洲尼罗罗非鱼品系和4个亚洲尼罗罗非鱼品系经混合选育获得的优良品系经过形状改良的尼罗罗非鱼，其优点是生长快、性状优良并且可以稳定遗传、容易驯化等[]。由于其性状的代表性且实验结果易观察测量，常常作为低等脊椎动物的实验中的实验对象[]。吉富罗非鱼的最适合生长季节为6月9月，但是6月9月持续的高温也增加了链球菌等霉菌的感染。本实验通过检测吉富罗非鱼血清中抗炎症因子和炎症促进因子的含量来摸索饲料中添加芦丁的最适量，以期为吉富罗非鱼的疾病防控提供基础的理论数据。

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