水稻精米谷蛋白含量的有利等位基因发掘【字数:7533】
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言2
1 材料与方法 2
1.1 材料种植与处理 2
1.1.1材料种植与保存2
1.1.2谷蛋白含量的测定2
1.1.3标准曲线的绘制2
1.2 数据分析 3
1.2.1表型分析3
1.2.2 群体遗传多样性分析 3
1.2.3 群体结构分析 4
1.2.4连锁不平衡 4
1.2.5农艺性状关联位点及优异等位变异的确定4
2 结果与分析 4
2.1 425份水稻材料谷蛋白含量表型分析5
2.2 自然群体SSR标记多样性 5
2.3 425份水稻材料基于SSR分子数据的群体遗传结构分析5
2.4 各亚群间的遗传分化与遗传距离8
2.5 连锁不平衡分析9
2.6与水稻谷蛋白含量显著关联的SSR标记位点和优异等位变异及典型材料10 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ¥351916072¥
2.6.1与水稻谷蛋白含量显著关联的SSR标记位点11
2.6.2 与水稻谷蛋白含量显著关联的优异等位变异及其载体品种11
3 讨论 12
致谢 14
参考文献 15
水稻精米谷蛋白含量的有利等位基因发掘
引言
引言
水稻是我国第一大粮食作物。稻米中的蛋白质是第二大贮藏物质,其含量仅次于淀粉(稻米中第一大贮藏物)。稻米蛋白是人们植物性蛋白摄取的主要来源,其含量高低与稻米营养价值密切相关[1]。谷蛋白是水稻种子中含量最高的贮藏蛋白,占种子总蛋白的70%以上,是稻米蛋白中可供人体吸收的主要成分。因此提高稻米中谷蛋白含量,符合广大人民对于提高稻米品质的强烈需求。但对于一些肾脏功能损害的病人来说,蛋白代谢方面存在困难。若食用稻米谷蛋白含量过高,会加重他们的肾脏负担而导致病情恶化。所以,肾脏病人需要的是尽可能降低稻米中可吸收蛋白的含量,即低谷蛋白稻米来满足他们蛋白代谢的特殊需求。
近年来,肾脏病患者人数不断增加。因此市场对低谷蛋白稻米需求量也随之增加。低谷蛋白稻米中可吸收的谷蛋白明显减少,不能被人体所吸收的醇溶蛋白含量则较高[2]。而高谷蛋白稻米中的可吸收蛋白含量高,稻米的营养价值随之提高,可以满足正常人群的消费需求。因此,发掘谷蛋白含量的有利等位基因可以更好的控制水稻中谷蛋白含量,生产出不同谷蛋白含量的水稻品种,以满足不同人群的相应市场需求。这是水稻育种上具有重要意义的一部分。
本研究的目的是通过发掘水稻精米中谷蛋白含量的有利等位基因,为分子标记辅助育种提供有效信息。
1.材料与方法
1.1 材料种植与处理
1.1.1 材料种植与保存 本研究所用材料为实验室保存的425个水稻品种。其中来自越南的有114个品种,其他311个品种均来自中国境内。这些品种的分布范围是北纬17°N54°N,东经102°E135°E,从南北共跨37个纬度,东西共跨33个经度。品种来源广,地理分布广泛,为挖掘优异等位基因提供可用的基因资源。2017年夏季将所有供试材料种植在大学江浦农场。5月中旬播种,6月中旬移栽,小区种植。每个品种种植1个小区,每个小区4行(行距20cm),每行8株(株距17cm),常规田间管理。
水稻种子成熟后,正季收获,常温下储藏3个月。各株系取约25克稻谷在出糙机上脱壳,然后经精米机碾米出精,再经粉碎机打成精米粉,分别过80目筛后装入封口塑封袋,置于20度冰箱,保存备用。
1.1.2谷蛋白含量的测定 准确称取精米粉0.1g于离心管中,加入1ml 70%乙醇溶液,于摇床上振荡提取2h,然后在12000r/min条件下离心10min,反复提取两次,不保留提取液。加1ml 0.2%氧氧化钠溶液于提取过醇溶蛋白的米粉沉淀中,然后在摇床上振荡提取2h,离心10min,离心机的转速为12000r/min。于50ml容量瓶中倾入上清液,重复提取2次,合并提取液。将提取液定容至50ml, 于10ml刻度试管中加入定容液3ml,加0.1%考马斯亮蓝比色液1ml,再定容至10ml,然后比色(UV754分光光度计,595nm)[3]。上述各供试水稻品种稻米谷蛋白含量的测定,每份样品重复2次,结果取其平均值。
1.1.3 标准曲线的绘制 首先配制标准蛋白质溶液,称取0.01g的牛血清蛋白于100ml的容量瓶中,加入蒸馏水稀释至刻度,混合均匀,即为100mg/L的标准蛋白溶液。放于45度冰箱保存;称取100mg的考马斯亮蓝G250,分别加入95%乙醇50ml,85%硫酸100ml,最后用蒸馏水定容至1000ml,存放在棕色瓶中,避光保存。
表1 0100µg/ml标准曲线的制作
Table 1 Fabrication of 0100µg/ml standard curve
编号
No.
100mg/L标准蛋白溶液(ml)
100mg/L standar protein solution (ml)
原文链接:http://www.jxszl.com/swgc/smkx/563194.html
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