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月月粉中aoscoi1基因的克隆及功能验证【字数:9424】

2024-02-24 17:33编辑: www.jxszl.com景先生毕设
茉莉酸(jasmonic acid,JA)及茉莉酸衍生物茉莉酸甲酯等是新型植物激素,广泛存在于植物体内,在植物的生长发育和应激反应中都起着重要的调控作用。本研究选取月季中茉莉酸合成途径中的关键基因AOS以及茉莉酸受体合成基因COI1进行研究,构建AOS-R05过量表达和VIGS干扰载体RNAi COI1-pTRV2,在月月粉叶片中观察其对抗病的作用。通过测定叶片上菌斑的大小可以确定月月粉中AOS基因的过量表达对抗病具有积极的作用,而受体合成基因COI1的沉默则对叶片抗病具有消极作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法3
1.1 材料 3
1.2 方法 4
1.2.1 真空渗透法检测外源茉莉酸对月季抗病性的影响3
1.2.2 提取叶片RNA4
1.2.3 一步法反转录cDNA4
1.2.4 月月粉中目的基因扩增4
1.2.5 构建过量表达载体AOSR05与VIGS干扰载体COI1pTRV25
1.2.6 组织培养月月粉7
1.2.7 真空渗透法将含有目的基因的农杆菌渗透进入月月粉叶片7
1.2.8 滴加菌液查看并统计菌斑大小7
1.2.9 提取转基因叶片DNA 7
1.2.10 选择表型明显的叶片进行荧光定量PCR7
2 结果分析8
2.1证明外源茉莉酸对抗病具有积极作用8
2.2 AOS和COI1基因的克隆和序列测定8
2.3 构建AOSR05与VIGS干扰载体RNAi COI1pTRV210
2.4 过量表达AOS、沉默激素受体合成COI1对月月粉抗灰霉病的影响12
3 讨论 14
致谢14
参考文献15
月季中AOS、COI1基因克隆及功能验证

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