：活性氧 (Reactive Oxygen Species，ROS)主要包括O2、O2-、H2O2和HO·，其阻碍根瘤菌与豆科植物实现共生固氮。在绝大多数已研究过的细菌中，有机过氧化物抗性蛋白调控因子OhrR专一性的被有机过氧化物诱导，而对H2O2不敏感。本研究中田菁根瘤菌ohrR基因敲除株(ΔohrR)较野生型菌株对H2O2更敏感，用6mM H2O2处理时生长即受到显著的抑制。说明在该菌中OhrR可能调控某些与H2O2代谢相关的基因。于是利用转座子标签的方法构建突变子文库，并筛选到了一株cyn插入失活的突变株。结果表明控制氰酸盐代谢的cyn基因与ohrR基因间存在调控关系，但是其与H2O2代谢之间的关系还有待进一步研究。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
1 绪论 1
1.1 生物固氮 1
1.2 抗ROS能力对细菌生长的重要性 2
1.3 ohrohrR基因与ROS 2
2 材料与方法 3
2.1 材料 3
2.1.1 实验菌株 3
2.1.2 酶与试剂 3
2.1.3 仪器 3
2.1.4 培养基 3
2.2 方法 3
2.2.1 生长曲线的测定 3
2.2.2 H2O2胁迫下的活菌计数 3
2.2.3 二亲接合建立突变子文库 3
2.2.4 接合子筛选 4
2.2.5 6 mM H202筛选受OhrR调控的与H2O2抗性相关的突变株 4
2.2.6 总DNA的提取 4
2.2.7 随机引物PCR 4
3 实验结果 5
3.1 生长曲线和H2O2胁迫曲线 5
3.2 转座子文库筛选和富集 6
3.3 确定目标菌株的突变位点 7
4 结果分析和讨论 7
致谢 9
参考文献 9
田菁根瘤菌中受OhrR调控的与ROS抗性相关的基因筛选
引言
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