：目的：实验选取禽流感病毒H9N2感染小鼠树突状细胞引起差异表达的miRNA-29c分子，通过TargetScan 预测miR-29c靶基因位点，利用PCR扩增预测的靶基因，构建相应靶基因的重组质粒，最后通过双荧光素酶报告基因活性检测鉴定预测基因是否为miR29c的靶基因。结果：首先我们预测并筛选CXCL9和RFX7作为miR-29c的靶基因；其次酶切电泳及测序结果显示重组真核表达质粒（pMIR-Report /CXCL9和pMIR-Report/RFX7）构建成功；最后在HEK-293T细胞中，双荧光素酶活性检测结果表明，两个靶基因中仅CXCL9是miRNA-29c的靶基因，miRNA-29c可以靶向结合CXCL9的保守位点抑制其表达。综上，本研究筛选并验证了CXCL9为miRNA-29c的靶基因，为进一步探讨miR-29c调节禽流感病毒的机制奠定基础。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
1 研究背景 2
1．1 禽流感病毒 2
1．2 HEK293T细胞 2
1．3 MicroRNA 2
2 材料与方法 3
2．1 材料和仪器 3
2．1．1 实验材料 3
2．1．2 实验细胞 3
2．1．3 实验试剂 3
2．1．4 实验器材 3
2．2 试验方法 3
2．2．1 预测miRNA29c靶分子 3
2．2．2 靶分子CXCL9和RFX7荧光素酶报告基因载体构建 3
2．2．3 HEK293T细胞体外诱导培养 6
3 结果与分析 6
3．1 MiRNA29c靶分子的预测 6
3．2 真核表达载体PMIRreport质粒鉴定结果 6
3．3 PMIRreport/CXCL9重组质粒与PMIRreport/RFX7重组质粒鉴定结果 7
3．4 HEK293细胞培养 7
3．5 双荧光素酶报告基因活性检测结果 7
3 讨论 8<
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br /> 致谢： 9
参考文献： 9
MiRNA29C靶基因的筛选及验证

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