目录
摘要Ⅱ
关键词Ⅱ
AbstractⅢ
引言
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1研究材料 2
1.1.1植物材料 2
1.1.2菌株与质粒2
1.2主要试剂与仪器2
1.3试验方法2
1.3.1目的基因ers25的克隆2
1.3.2利用Gateway技术构建玉米ers25基因植物表达载体5
1.3.3农杆菌感受态制备8
1.3.4重组质粒转化农杆菌感受态8
1.3.5农杆菌的培养和活化9
1.3.6拟南芥的种植9
1.3.7农杆菌介导的拟南芥转化9
1.3.8转基因植株的鉴定9
1.3.9转基因拟南芥功能的分析11
2.结果与分析11
2.1载体构建结果11
2.2转ers25基因拟南芥GUS检测14
2.3转基因拟南芥的PCR鉴定 14
2.4转基因拟南芥的RTPCR检测14
2.5转ers25基因拟南芥的表型分析15
3.结论16
致谢16
参考文献17
玉米性别决定突变体Ts3候选基因ers25的过量表达载体构建和转基因功能分析
摘 要
[目的]Tasselseed 3（Ts3）是玉米性别决定的关键基因之一，目前6个TS基因中只有Ts3尚未被克隆到，因此定位Ts3并研究其分子功能对于进一步揭示玉米雄穗性别决定的分子机制十分重要。本实验通过对Ts3的一个候选基因ers25的过量表达和基因功能分析，以推测ers25是否可能是Ts3基因，为下一步在玉米中探索Ts3的功能奠定基础。[方法]利用Getway技术构建目的基因的过量表达载体并通过侵花法转入拟南芥中。通过喷施除草剂Basta、PCR和RTPCR等实验鉴定阳性转基因苗，观察统计T2代转基因拟南芥的性状。[结果]成功构建ers25的过量表达载体；将其转入拟南芥中，筛选出阳性转基因苗30株以上，转基因拟南芥的角果结实率比较低。[结论]ers25可能不是 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: #351916072# 
Ts3。
CONSTRUCTION OF OVEREXPRESSION VECTOR AND ANALYSIS OF TRANSGENIC FUNCTION OF MAIZE SEXDETERMINING MUTANT Ts3 CANDIDATE GENE ers25
ABSTRACT
[Objectives]Tasselseed 3 (Ts3) is one of the key genes for sex determination in maize. Currently, only Ts3 among the six TS genes has not been cloned. Therefore, it is very important to locate Ts3 and study its molecular function to further reveal the molecular mechanism of maize tassel sex determination. In this experiment, by overexpression and gene function analysis of a candidate gene ers25 of Ts3, it is speculated whether ers25 may be the Ts3 gene, which lays the foundation for exploring the function of Ts3 in corn in the next step.[Methods]Use Getway technology to construct the overexpression vector of the target gene and transfer it into Arabidopsis thaliana by invasive method. The positive transgenic seedlings were identified by spraying the herbicide Basta, PCR and RTPCR, and the traits of T2 transgenic Arabidopsis were observed and counted.[Results]The overexpression vector of ers25 was successfully constructed; it was transformed into Arabidopsis thaliana, and more than 30 positive transgenic seedlings were screened out. The transgenic Arabidopsis has a low rate of fruit setting.[Conclusion] ers25 may be not Ts3.
KEY WORDS：maize；Arabidopsis thaliana；Tasselseed 3(Ts3)；ers25；Genetically modified
引言
我国最重要的粮食作物之一就是玉米[1]，是一种十分典型的，雌雄同株异花授粉作物。通过性别决定形成具有功能的单性花，而单性花的形成经需要经过十分复杂的性别决定过程。通过雄穗一一小花和雌穗下位花的一一雌蕊原基以及雌穗小花雄蕊一一原基的选择性败育(或退化),玉米最终一一形成正常的雌雄一同株单性花。[2]因为玉米性别决定的过程十分的复杂，使得人们对于其机理的认识不是特别的深入[3]。随着近年来不断地对玉米性别的决定过程的研究深入，性别决定理论不断的被完善，人们通过实验得到了越来越多的成果。

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