线粒体是细胞能量生产的结构，其主要的作用是为植物细胞提供能量，线粒体异常与细胞质雄性不育密切相关。复合体I是线粒体产能的关键位置，因此它的功能异常可能会导致严重的发育缺陷。前期通过对大豆不育系NJCMS11A和保持系NJCMS11B花芽转录组测序，从差异表达基因列表中挑选一个差异基因NADH脱氢酶B2基因。本实验从NJCMS11A和NJCMS11B花蕾中克隆了GmNDB2基因，该基因编码区序列（CDS）全长均为1731bp，且核苷酸序列比对一致，编码含576个氨基酸的交替型NADH脱氢酶基因。组织表达分析表明，GmNDB2 在各个组织均有表达并且在不育系NJCMS11A花蕾中的表达水平极显著的高于保持系NJCMS11B花蕾中的表达水平。亚细胞定位结果显示NADH脱氢酶B2基因定位于线粒体中。此外，还构建了植物过表达载体，并采用花絮侵染法侵染野生型拟南芥，成功得到阳性植株。以上研究结果为深入探索大豆质核互作雄性不育分子机理提供了依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1 材料与方法3
1.1 材料 3
1.2 方法 3
1.2.1 总RNA的提取与cDNA第一链的合成3
1.2.2 NADH 脱氢酶B2基因的克隆3
1.2.3 生物信息学分析3
1.2.4 NADH脱氢酶B2组织表达分析3
1.2.5 植物过表达载体的构建4
1.2.6 花序侵染法侵染拟南芥4
2 结果与分析4
2.1 GmNDB2的克隆与序列分析4
2.2 GmNDB2基因在NJCMS11A和NJCMS11B中的表达模式分析5
2.3 GmNDB2过表达载体构建及转基因植株获得5
3 讨论6
致谢7
参考文献7
图1 大豆GmNDB2基因PCR扩增产物4
图2 GmNDB2的功能域预测5
图3 GmNDB2基因在大豆细胞质雄性不育系 NJCMS11A 及其保持系 NJCMS11B 中的表达
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模式分析5
图4 植物过表达载体 pCAMBIA3301GFPGmNDB2 图示6
图5 转基因阳性苗筛选6
大豆NADH脱氢酶B2基因的克隆与表达分析

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