BBXs蛋白在植物的开花、光调节植物生长及响应生物和非生物胁迫等方面都有重要的调控作用，但是关于BBXs的研究大多存在于拟南芥和水稻领域。本实验以夏菊品种‘优香’为材料，采用高保真PCR的方法验证CmBBX28.2基因ORF序列，并进行基因序列分析。构建超表达载体pDEST-35AA-SRDX-CmBBX28.2，使用农杆菌浸花法遗传转化野生型拟南芥Col-0。利用SDS法提取超表达拟南芥的DNA，选择基因ORF正向特异引物以及pDEST-35AA-SRDX载体反向引物进行PCR检测，将阳性植株提取RNA，反转录合成cDNA，经过半定量检测，最终获得15株超表达拟南芥。本实验的研究结果可为进一步探讨CmBBX28.2的生物学功能和基因工程控制菊花花期奠定基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1实验材料、菌株与载体2
1.2菊花CmBBX28.2基因克隆 2
1.2.1总RNA提取和cDNA合成2
1.2.2目的基因克隆3
1.3菊花CmBBX28.2基因同源序列比对4
1.3表达载体的构建4
1.4拟南芥遗传转化及阳性苗鉴定4
1.4.1质粒转化农杆菌感受态4
1.4.2农杆菌侵染拟南芥和转基因苗的筛选5
1.4.3单拷贝纯合株系获得以及PCR鉴定5
1.4.4半定量PCR分析5
2结果与分析6
2.1菊花CmBBX28.2基因克隆6
2.2菊花CmBBX28.2基因同源序列比对6
2.3菊花CmBBX28.2转基因拟南芥株系获得和鉴定7
2.3.1CmBBX28.2转基因拟南芥株系获得7
2.3.2CmBBX28.2转基因拟南芥株系的鉴定7
2.4半定量PCR分析7
3讨论 8
参考文献8
菊花CmBBX28.2基因拟南芥遗传转化

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