为了研究菊花BBXs家族基因在植物开花过程中所发挥的作用及分子机制，本实验选择菊花品种‘神马’作为材料，基于‘诱饵’蛋白CmBBX24酵母双杂交的筛库结果，利用高保真全长验证技术从中克隆得到一个BBXs转录因子CmBBX28.1基因开放阅读框序列(552bp)，编码184个氨基酸，并构建菊花CmBBX28.1遗传转化表达载体pDEST_35AA_SRDX_BCKH- CmBBX28.1，通过冻融法将重组质粒转化到农杆菌感受态EHA105，采用农杆菌浸花法将目的基因遗传转化拟南芥，最终进行筛选培养，获得阳性苗。利用SDS法提取阳性苗的基因组DNA，选择pDEST_35AA_SRDX_BCKH载体反向引物以及基因ORF正向特异引物，经PCR检测验证菊花CmBBX28.1超表达载体成功整合到植物基因组中，获得2株转CmBBX28.1基因拟南芥阳性株系。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 实验材料2
1.1.1 植物材料2
1.1.2 菌株与表达载体2
1.1.3 试剂与仪器设备2
1.2 菊花CmBBX28.1基因克隆2
1.3 菊花CmBBX28.1基因序列分析3
1.4 菊花CmBBX28.1遗传转化表达载体的构建3
1.5 拟南芥遗传转化及阳性苗鉴定5
1.5.1 质粒转化农杆菌感受态5
1.5.2 农杆菌侵染拟南芥花序5
1.5.3 拟南芥转基因苗筛选5
1.5.4 转基因植株PCR鉴定6
2结果与分析7
2.1 菊花CmBBX28.1基因克隆7
2.2 菊花CmBBX28.1基因序列比对同源性分析7
2.3 拟南芥遗传转化及阳性苗鉴定8
2.3.1 转基因拟南芥阳性株系的获得8
2.3.2 转基因拟南芥阳性株系PCR鉴定8
3 讨论9
致谢9
参考文献10
附录11
菊花CmBBX28. *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072^ 
1基因遗传转化拟南芥的研究

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