类黄酮3-羟化酶(flavonoid 3′-hydroxylase, F3H)属于细胞色素P450家族(cytochromeP450, CYP450)，在植物主要成色物质花青素的合成中发挥重要作用。本实验以‘八卦洲水芹’以及紫色叶柄突变型水芹为实验材料，利用RT-PCR方法，从紫色叶柄突变型水芹的cDNA中克隆得到编码类黄酮3-羟化酶的基因，命名为OjF3H1。序列分析显示，OjF3H1基因全长1 575 bp，共编码524个氨基酸。OjF3H1蛋白相对分子质量为58 292.59，理论等电点为6.77。系统进化分析显示，OjF3H1蛋白具有高度保守性。OjF3H1编码的蛋白属于疏水蛋白，无序化比例为5.53%，空间结构主要由α-螺旋和β-折叠组成。实时定量PCR分析显示，OjF3H1在不同品种水芹茎中相对表达量有明显差异，紫色叶柄突变型水芹中OjF3H1的表达量明显比‘八卦洲水芹’中高。本研究通过对水芹OjF3H1基因的克隆与表达特性分析，为进一步深入开展水芹类黄酮生物合成途径研究提供基础。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract. 3
Key words 3
引言 3
1 材料与方法 5
1．1 材料及处理 5
1．1．1 总RNA的提取及cDNA合成 5
1．1．2 水芹类黄酮3′羟化酶基因克隆 5
1．2 序列分析 6
1．3 基因表达特性分析 6
2 结果与分析 6
2．1 水芹OjF3H1基因的克隆 6
2．2 水芹OjF3H1蛋白的进化分析 7
2．2．1 不同物种F3H蛋白氨基酸序列比对与氨基酸理化性质分析 8
2．2．2 不同物种F3H蛋白氨基酸理化性质分析 8
2．3 水芹OjF3H1氨基酸亲疏水性以及无序化分析 9
2．4 水芹OjF3H1蛋白的三级结构预测及分析 11
2．5 OjF3H1基因在紫色和非紫色水芹茎不同生长时期的表达分析 12
3 讨论 12
3．1 类黄酮3羟化酶的作用与特性 12< *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072* 
br /> 3．2 水芹中类黄酮3羟化酶基因的特征 12
致谢 13
参考文献 15
水芹类黄酮3羟化酶基因的克隆与表达特性分析

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