摘要：赤霉素-2氧化酶（GA2ox）是赤霉素代谢过程中的一种关键酶，能将有生物活性的赤霉素转变为无生物活性的赤霉素。本文首先通过生物信息学的方法对森林草莓Hawaii-4 GA2ox基因家族进行鉴定和分析,得到了8个草莓GA2ox候选基因。物种进化分析表明,草莓GA2ox基因在保守结构域和基因结构方面,与拟南芥中的同源基因存在较高的相似性。通过特异性引物扩增到了其中一个基因的cDNA序列，并构建了原核和转基因表达载体，为进一步的功能验证奠定了基础。
目录
关键词 1
Abstract： 1
Key words: 1
1. 森林草莓GA2ox基因家族的生物信息学分析 2
1.1 森林草莓GA2ox基因成员的鉴定 2
1.1.1拟南芥GA2ox的序列获取 2
1.1.2草莓GA2ox序列鉴定 2
2.森林草莓GA2ox基因的克隆 3
2.1 主要试剂与仪器 3
2.2 植物材料和处理 3
2.3 森林草莓总RNA的提取与反转录 3
2.3.1 CTAB法提取草莓RNA 3
2.3.2 cDNA的合成 4
2.4 森林草莓GA2ox基因的扩增 5
2.4.1基因特异引物的设计 5
2.4.2 PCR得到目的基因 5
3. 结果与分析 6
3.1 森林草莓 GA2ox基因的鉴定 6
3.2 mrna05020的克隆与转基因载体构建 7
3.2.1采用CTAB法提取森林草莓叶片总RNA： 7
3.2.2 目的片段的扩增： 7
3.2.3 mrna05020表达载体的构建 8
4.讨论 8
4.1 GA2ox在高等植物中的保守性 8
4.2 森林草莓中不同的GA2ox具有不同的表达模式 9
致谢 9
参考文献 10
森林草莓赤霉素氧化酶GA2ox基因家族的
生物信息学分析与基因克隆

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