红罗非鱼作为一种优良的经济型鱼类，其养殖过程中出现的体色分化变异，是限制其大规模集约化养殖的瓶颈。本文从黑色素合成通路的分子角度选取了两种影响体色的基因tyr和dct，通过荧光定量PCR比较这两种基因在红罗非鱼不同组织以及三种不同体色马来西亚红罗非鱼（粉白、红斑、黑斑）皮肤组织的表达特性。实验结果发现dct和tyr在三种不同体色罗非鱼不同组织的表达量存在差异。tyr基因在三种体色的红罗非鱼的背部表达量显著高于腹部。在黑体色和红体色中，背部皮肤中表达量最高，在心脏中表达量最低；在粉白体色中肌肉组织中表达量最高。dct基因在红体色和粉白体色的红罗非鱼的背部表达量显著高于腹部表达量。黑体色腹部皮肤表达量最高。dct基因在白体色的心脏中的表达量显著高于其他组织。在黑体色的肠组织中的表达量高最高且显著高于于同体色其他组织。在红体色的脑组织中表达量最高。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1文献综述2
1.1红罗非鱼简介 2
1.2红罗非鱼体色分离2
1.3黑色素与体色2
1.3.1黑色素合成2
1.3.2tyr基因3
1.3.3dct基因3
1.4实时荧光定量3
2 材料与方法3
2.1 实验材料3
2.2 实验仪器4
2.3 实验试剂4
2.4 实验方法4
2.4.1 引物设计5
2.4.2 RNA的提取及反转录5
2.4.3 荧光定量5
2.4.4 数据处理5
3 实验结果 6
3.1 tyr基因在不同体色红罗非鱼背腹部皮肤的表达情况6
3.2 dct基因在不同体色红罗非鱼背腹部皮肤的表达情况6
3.3 tyr基因在红罗非鱼不同组织中的表达情况7
3.4 dct基因在红罗非鱼不同组织中的表达情况8
4 讨论 8
4.1 tyr和dct基因在不同体色红罗非鱼背部和腹部皮肤的表达情况9
4.2 tyr和d *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: &351916072& 
ct基因在不同组织中的表达情况9
4.3 tyr和dct基因的表达情况总结10
致谢10
参考文献11
红罗非鱼tyr和dct基因的表达特性研究
引言
引言
红罗非鱼作为水产专家改良的一种新品种鱼类，由于其对环境的适应性强、肉质鲜美等优点，已经成为一种具有较高经济效益的鱼类。但是，实践发现，红罗非鱼在养殖过程中存在着体色分化变异的现象。此现象会影响红罗非鱼的经济效益，限制红罗非鱼的集约化养殖。因此研究红罗非鱼体色的影响因素具有十分重大的意义。对于鱼的体色，目前研究较多的是黑色素细胞。因此本实验选择与黑色素合成相关的基因酪氨酸（tyrosine，tyr）和多巴色素互变异构酶（dopachrome tautomerase，dct）进行研究。这将有助于为从基因角度研究红罗非鱼的体色变异的分子遗传机制打下基础，对罗非鱼表观性状和遗传学具有重要意义。除此之外还能帮助寻找有效防止红罗非鱼体色变异的方式方法，有利于促进罗非鱼养殖业的蓬勃发展。
1 文献综述
1.1红罗非鱼简介
红罗非鱼属丽鱼科，罗非鱼属，是莫桑比克罗非鱼和尼罗罗非鱼杂交后代的突变种。红罗非鱼鱼体颜色为红色，形似真鲷，体腔无覆膜，肉质鲜美，生长迅速，繁殖能力强，对盐度有很强的适应性，且具有较强的抗病力，经济效益好且具有营养，深受消费者喜爱[1]。红罗非鱼的经济价值体现在其经济价位是黑色罗非鱼34倍，是一个具有推广前景的品种[2]。由于红罗非鱼是一种新培育的鱼类，因此暂时国内外对红罗非鱼的研究相对较少，研究内容主要集中在生长性状、体色分离及其营养等的研究[2]。
1.2红罗非鱼的体色分离
红罗非鱼多半是自交多代产生的，在培植过程中会出现体色分离的现象，产生红斑、黑斑、粉白等杂色个体[3]。不同体色红罗非鱼生长速率存在很大的差异，其中粉白个体生长性能是影响其经济价值的重要因子[4]。由此可见，体色变异现象在很大程度上会影响红罗非鱼的经济效益。由于体色变异对罗非鱼销售和推广的影响，红罗非鱼的体色变异现象一直是困扰其集约化规模养殖的主要瓶颈[5]。
研究表明，马来西亚红罗非鱼越冬期的体色变异可能其皮肤黑色素细胞数量和体内酪氨酸酶活性改变的结果，深入研究其调控机制有助于了解鱼类体色遗传机理并进行体色性状的改良[6]。
1.3 黑色素与体色
黑色素是一种广泛存在于动物、植物和微生物的生物色素，主要分布在人类或动物的皮肤、视网膜、胆囊及卵巢等部位。黑色素的产生或缺乏是动物形成不同体色的主要物质基础，而色素的形成是由不同基因间的相互作用与环境因素共同决定[7]。鱼类色素细胞的分化和形成受控于一系列复杂的基因激活和沉默程序[8]。黑色素是一种广泛存在于脊椎动物皮肤、眼睛、毛发中的生物多聚体，由细胞器黑色素小体合成，其合成过程与酪氨酸酶(tyr)密切相关[9]。黑色素有两种:一种是褐黑素，为溶于碱的圆形红色颗粒，表现黄和红色的毛色；另一种是真黑素，包括黑色和褐色两种色素类型[10]。
1.3.1黑色素的合成
对于黑色素的研究，国外开始的较早，其中Cooksey和Schallreuter的研究较为完善，从黑色素细胞的迁移、分裂至成熟、黑色素小体(melanosome)的形成、黑色素的合成、黑色素颗粒的转运以及黑色素的排泄等方面阐述了合成过程[11]。合成必须有3种物质的参与:合成黑色素的最初底物酪氨酸；催化该底物最终转变形成黑色素的限速酶一酪氨酸酶(tyrosinase，TYR)以及参与此催化过程的氧元素[12]。在动物体内一共有三种传导途径合成黑色素，分别是腺甘酸环化酶途径，蛋白激酶C途径和酪氨酸途径。通过通路活化有利于黑色素的生成，其中腺甘酸环化酶在黑色素合成通路中起关键作用[13]。
1.3.2tyr基因

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