为了解斑马鱼IGF2a基因对斑马鱼生长性能的影响，以斑马鱼为实验材料设计IGF2a 基因的靶位点序列，采用CRISPR/Cas9技术敲除IGF2a 基因，通过测交，获得稳定遗传的突变型斑马鱼，比较分析突变型斑马鱼与野生型斑马鱼生长性状，研究发现敲除IGF2a基因使斑马鱼体重、体宽、体高3个生长指标增大，体长与全长2个生长指标减小，在体长体高比方面，无论是否发生突变，雄性斑马鱼的比例始终比雌性斑马鱼的比例大。 这说明IGF2a 基因可能影响斑马鱼的体重、体宽，体高，且基因与性别之间存在某种关系可以影响鱼体的形态比例。这些结果将为IGF2a 基因分子育种奠定基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1基因编辑斑马鱼的构建2
1.1.1CRISPR/Cas9技术原理及质粒构建2
1.1.2gRNA靶位点设计2
1.1.3靶点特异性检测3
1.1.4体外转录合成gRNA3
1.1.5体外转录合成Cas9 mRNA3
1.1.6显微注射3
1.1.7突变效率检测3
1.1.8获得稳定遗传的突变杂合斑马鱼3
1.2基因编辑斑马鱼的饲养3
1.2.1饲养环境3
1.2.2饵料培养及投喂3
1.3基因编辑斑马鱼的鉴定3
1.3.1突变型斑马鱼DNA提取3
1.3.2PCR扩增检测基因突变情况4
1.4数据处理4
2 结果 4
2.1gRNA靶位点选择4
2.2gRNA效果检测4
2.3获得稳定遗传的IGF2a基因的斑马鱼5
2.4IGF2a基因敲除对斑马鱼生长性能的影响6
2.5IGF2a基因敲除对斑马鱼体长体高比的影响7
3讨论7
致谢8
参考文献8敲除IGF2a基因斑马鱼的生长性能的表现

原文链接：http://www.jxszl.com/nongxue/scyz/561300.html