本实验在鲤鱼基因组中挖掘到了两个IL-17N旁基因并使用RT-PCR进行了验证和克隆。这两个基因的开放阅读框全长均为411 bp，编码136个氨基酸，氨基酸一致性/相似性分别为91.2%和97.1%，被命名为CcIL-17Na和b。它们和其他硬骨鱼类IL-17N的一致性为46.8%-90.4%，但和鲤鱼IL-17家族其他成员的一致性最高只有30.2%。系统树显示，硬骨鱼类及其祖先雀鳝和四足动物祖先腔棘鱼的IL-17N以97%的高置信度聚集于同一支，表明IL-17N是一个原始、保守的基因。定量RT-PCR结果表明CcIL-17Ns在健康个体的脑中表达量丰富；嗜水气单胞菌能诱导CcIL-17Ns的表达，表明他们参与了炎症反应。本实验构建了IL-17N-pGXE-4T-1原核表达质粒，通过0.2mM IPTG的诱导，GST柱纯化，得到了具有生物活性的鲤鱼IL-17N融合蛋白，为今后IL-17N蛋白功能及信号通路的研究奠定了基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料2
1.1实验鱼 2
1.2实验试剂 2
1.3菌株与质粒3
1.4实验引物3
2方法3
2.1鲤鱼IL17N基因的克隆与序列分析3
2.2鲤鱼IL17Ns基因表达4
2.3鲤鱼IL17N的原核表达及蛋白纯化4
3 结果5
3.1鲤鱼IL17N基因序列分析5
3.2鲤鱼IL17Ns基因表达10
3.3鲤鱼IL17N的原核表达及蛋白纯化11
4 讨论12
4.1鲤鱼IL17N基因序列分析12
4.2表达模式分析13
4.3鲤鱼IL17N的原核表达及蛋白纯化13
致谢14
参考文献14
附录116
鲤鱼IL17N基因的克隆、表达及其原核表达蛋白的制备

原文链接：http://www.jxszl.com/nongxue/scyz/560812.html