细胞色素P450氧化酶对杀虫剂的解毒代谢作用增强是导致昆虫对杀虫剂产生高抗性的重要原因。细胞色素p450在催化反应时需要P450还原酶、细胞色素b5等协同才能进行完整电子传递以完成复杂的氧化还原反应，使得细胞色素P450氧化酶同工酶的功能难以被单独研究。本实验采用杆状病毒介导的sf9昆虫细胞（真核）表达系统成功表达了烟粉虱P450基因CYP6CX4的蛋白产物，并通过UPLC-MS检测证实了其对吡虫啉的氧化代谢作用。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法1
1.1 PCR的扩增及克隆测序 ..1
1.2 重组表达载体的构建......2
1.3 昆虫细胞培养、转染与病毒制备3
1.4 重组蛋白的获得与提纯....4
1.5 重组蛋白的免疫印迹试验....4
1.6 重组蛋白代谢实验........5
2结果与分析5
2.1 CYP6CX4基因的扩增及表达载体构建... ......5
2.2 WesternBlot蛋白免疫印迹验证... ......6
2.3 重组蛋白代谢结果..... ......6
2.3.1 MRM检测结果.....7
2.3.2 代谢产物一级质谱结果.......7
3讨论.............8
致谢.....9
参考文献....9
烟粉虱细胞色素P450基因CYP6CX4的克隆与异源表达

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