番茄斑萎病毒属（Tospovirus）侵染植物，寄主范围广泛，危害严重，植物SnRK1蛋白激酶是植物体内生理活动的调控枢纽之一。酵母双杂交证明SnRK1与NSm存在互作关系，利用VIGS(TRV)沉默模式植物本氏烟SnRK1，病毒含量升高，猜测SnRK1对病毒侵染有影响。但植物中SnRK1过表达对于病毒的影响尚未有研究报道。本实验主要研究SnRK1过表达对于病毒的影响，补充SnRK1与NSm互作关系。采用电转化法将植物表达载体p2300-SnRK1导入农杆菌GV3101菌株中，采用叶盘法转化本氏烟（Nicotiana benthamiana），获得转基因本氏烟植株，摩擦接种TSWV，Western Blot检测病毒含量（不同时间点），观察表型症状（发病时间、发病程度、病情指数）。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1试验材料 2
1.2试验方法 2
1.2.1简单的酵母双杂方法2
1.2.2 Trizol法提取植物RNA3
1.2.3反转录获取cDNA3
1.2.4植物表达载体的构建4
1.2.5大肠杆菌的转化与检测阳性克隆4
1.2.6电击转化农杆菌5
1.2.7烟草叶盘法转基因本氏烟5
1.2.8转基因烟草阳性植株的检测6
1.2.9对转基因本氏烟植株进行TSWV摩擦接种6
1.2.10 Western Blot分析6
2结果与分析6
2.1酵母双杂6
2.2 P2300SnRK1载体的构建7
2.3烟草叶盘法转化本氏烟8
2.4转基因本氏烟阳性植株的检测9
2.5接种TSWV转基因本氏烟表型症状9
2.6接种TSWV Western Blot检测10
3讨论10
致谢11
参考文献11
SnRK1与TSWV运动蛋白NSm的互作及对病毒侵染的影响

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