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小rna结合蛋白argonaute调控组蛋白修饰的机理研究【字数:6146】

2024-02-24 16:55编辑: www.jxszl.com景先生毕设
DNA甲基化和组蛋白甲基化是真核生物体内重要的表观遗传修饰,二者与异染色质的形成密切相关。在拟南芥中,由RNA介导的DNA甲基化(RdDM)途径是介导转座子沉默和维持基因组稳定性的重要机制。ARGONAUTE是RdDM通路的关键蛋白,其可以与siRNA结合进而指导DNA甲基转移酶DRM2在RdDM靶位点进行从头甲基化。然而siRNA对组蛋白甲基化调控的研究却相对较少。SUVH4/5/6是负责组蛋白H3第9位赖氨酸甲基化(H3K9me)的甲基转移酶。先前的研究发现,siRNA和AGO4的缺失会影响某些位点的H3K9me水平,本研究利用同源重组的方法克隆了AGO4和SUVH4/5/6,并通过Split-LUC系统检测到AGO4与SUVH4/5/6间存在互作,这表明AGO4-siRNA复合体可能会直接招募SUVH4/5/6进行H3K9me的修饰,这将为我们理解siRNA、组蛋白修饰以及基因沉默之间的关系提供全新的视角。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法3
1.1实验材料3
植物材料3
1.1.2 菌株与载体3
1.2实验方法 3
1.2.1拟南芥的培养3
1.2.2 拟南芥RNA的提取和cDNA的制备4
1.2.3 基因克隆与载体构建4
1.2.4 农杆菌介导的烟草瞬时转化5
2 结果与分析5
2.1 AGO4CLUC与SUVH4/5/6NLUC载体构建5
2.2 AGO4与SUVH4/5/6间存在蛋白互作8
3讨论 9
致谢9
参考文献9
小RNA结合蛋白ARGONAUTE调控组蛋白修饰的机理研究

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