大豆虫害对大豆的产量和品质危害很大，其中斜纹夜蛾是南京地区的主要害虫。野生大豆作为栽培豆的祖先种，在进化过程中保留了很多抗性基因。本文以121个野生大豆品种为材料，用新鲜叶片在室内喂养斜纹夜蛾幼虫，以虫重为抗性指标，进行方差分析，分析结果表明野生大豆材料之间存在着极显著差异，其中W83、W99、W119和W120这四种材料是高抗品种。与SNPs标记进行关联分析后找到了野生大豆中与斜纹夜蛾抗性显著相关的位点，并确定了附近基因。通过搜索大豆数据库网站对这些基因进行筛选，最终得到了5个或与抗虫相关的基因，以便后期的功能验证。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法3
1.1试验材料 3
1.2试验设计 3
1.3测定项目与方法3
2结果与分析3
2.1材料之间的表型差异3
2.2 群体材料的抗性分级4
2.3抗斜纹夜蛾相关性状与标记的全基因组关联分析4
3讨论5
致谢6
参考文献6
野生大豆对斜纹夜蛾抗性的关联分析
引言
引言
大豆是中国重要的粮食作物之一，其种子含有丰富的植物蛋白，兼具营养、食用、饲用、药用和工业用途。目前世界上已知的大豆害虫的数量高达数百种，常年造成大豆产量下降和品质降低，其中尤以食叶性害虫的危害明显，国际上的抗虫性研究也主要针对于食叶性害虫，包括我国北方的大豆食心虫，黄淮地区的棉铃虫、豆天蛾，豆秆黑潜蝇，以及南方的大造桥虫、豆卷叶螟、斜纹夜蛾、豆荚螟等[1]。其中斜纹夜蛾是南京地区的主要害虫[2]，它属鳞翅目夜蛾科，是世界性的多食性大害虫，国内以黄河和长江流域为多发区域，具有寄主多、世代多、抗药性强等特点，一般低龄幼虫对作物影响不明显，4龄幼虫起食量明显大增，且抗药性明显增强[3]。
国内外大豆抗虫性的研究主要为抗食叶性害虫的研究，并且已经取得了一定的成就。Rector等[46]证明大豆对棉铃虫的抗生性相关的QTLs主要集中在第7、13、14、16、18五条染色体上，排趋性相关的QTLs主要集中在第2 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
、6、7、12、13五条染色体上。Nobuhiko Oki等[7]利用重组自交系群体发现了大豆斜纹夜蛾排趋性相关的两个QTLs， qRslx1 和qRslx2 ，分别位于7号和12号染色体上。Terry等[8]在“Minsoy”和“Noir 1”的重组自交系群体（MN）中发现了大豆抗虫性基因，明确与数量性状位点连锁的RFLP标记和SSR标记，并用另一个群体（Minsoy× Archer,MA）来验证。玉米穗螟幼虫用MN和MA 群体的家系喂养，幼虫重、幼虫历期、蛹重、存活率等虫体性状作为鉴定指标，构建了20个大豆连锁群，MN在5个连锁群上找到QTL，MA在4个连锁群上找到QTL。其中，位于U2连锁群上的QTL与幼虫历期主要效应有关，在两个连锁群均检测到了，对形状变异的解释率分别为12%和28%，其它QTL对其有减效作用，效应为10%。王慧[9]以皖82178×通山薄皮黄豆甲组合的重组自交系群体为材料，以斜纹夜蛾的幼虫重、蛹重和幼虫历期为鉴定目标，选用与抗虫性有关的8个大豆连锁群上的SSR引物103对，筛选大豆对斜纹夜蛾抗性QTL分子标记。通过t测验共检测出5个与抗虫性有关的SSR标记，分布在3个连锁群上，一串距离为29.741.2Cm，单个标记对性状的变异解释率为2.89%9.73%。付三雄等[10]利用抗虫性材料科丰1号与感虫性材料南农11382杂交衍生的重组自交系群体，在O 连锁群上定位到1个新的抗虫相关QTL，对性状变异的解释率为11.74%; 在Dlb +W 和L 连锁群上分别定位到1个抗虫相关QTL，对性状变异的解释率分别为11. 30%和6. 36%。通过进一步增加标记数量和类型，Kim等[11]在科丰1 号与南农11382 杂交衍生的重组自交系群体中定位了13个抗虫相关QTL，在先进2 号与赶泰22 衍生的重组自交系群体中定位了3个抗虫相关QTL。
一年生野生大豆（Glycine soja）是大豆属（Glycine）soja亚属中的一个种，普遍认为是栽培大豆的近缘野生种[1213]。
野生大豆在长期的进化过程中形成很强的适应环境能力, 包括对盐碱、 水渍、 干旱、 土壤贫瘠等非生物胁迫具有极强的耐性, 对于蚜虫、花叶病毒、包囊线虫、灰斑病等威胁栽培大豆生产的主要病虫害也表现出良好的抗性。野生大豆在长期的自然选择条件下，进化出了丰富的变异类型和较强的环境适应能力，如单株荚数多、适应性广、蛋白质含量高、抗逆性强等特点[14]。而野生大豆向栽培大豆演化的过程，也是一个长期人工选择的过程，这一过程中表型性状和基因性状都发生了很大变化，这些变化都是向着更有利于人类需求的方向发展，如籽粒由小变大，植株由蔓生变直立等[15]。
关于野生大豆的遗传多样性，近年来科研工作者分别从表型水平、酶水平、基因水平和细胞器水平进行了深入的研究，结果表明与栽培大豆相比，野生大豆具有较丰富的变异。其中基因水平不易受环境影响，结果可靠，多态性高，是野生大豆遗传多样性研究中应用最为广泛的一种手段[16]。基因水平主要是以DNA分子标记为手段，目前常见的DNA分子标记技术有以Southern杂交技术为核心的RFLP标记，基于PCR的RAPD、AFLP、SSR、ISSR以及SNP标记。赵洪锟等[17]选择我国2452°N代表性纬度的野生大豆和栽培大豆地方品种各10份，利用AFLP技术进行遗传多样性的分析，结果选用的11个引物组合共扩增出935条带，其中多态性条带402个，其中只在栽培豆中出现的特异位点33个，占总多态性位点的8.2%，只在野生豆总表现出特异性的位点有114个，占总多态性位点的28.4%，表明野生大豆遗传多样性比栽培大豆更丰富。赵洪锟等[18]利用40对SSR引物对我国不能纬度的野生大豆和栽培大豆各22份进行多样性分析，其中有12对引物表现出多态性，结果显示野生大豆遗传多样性比栽培大豆更为丰富，平均遗传距离分别为0.176和0.150。丁艳来等[13]以来自全国24省区的196分野生大豆为材料，采用均匀分布的52对SSR引物和10个植物学性状进行中国野生大豆遗传多样性的研究，研究结果是分子水平上野生大豆的遗传多样性明显高于栽培群体，表型水平上中国野生大豆植物学性状变异丰富。文自翔等[12]选用60对细胞核SSR标记和11对叶绿体SSR标记，对393份地方品种和196份野生大豆进行遗传多样性分析，结果表明野生群体在质、核水平上遗传多样性都明显大于栽培群体)。从这些结果可以看出野生大豆含有丰富的遗传变异，从中挖掘抗虫相关基因是大豆抗虫研究的新方向。

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