RNA介导的DNA甲基化（RdDM）是植物中介导转座子、重复序列等区域的DNA从头甲基化的重要分子途径。RdDM对于维持植物基因组稳定及调控基因表达的具有重要的调控作用。植物中特有的DNA依赖的RNA聚合酶Pol V在RdDM途径中起重要的作用。在拟南芥中的研究表明Pol V 的最大亚基NRPE1与由DEFECTIVE IN RNA-DIRECTED DNA METHYLATION 1（DRD1）、DEFECTIVE IN MERISTEM SILENCING 3（DMS3）和RNA-DIRECTED DNA METHYLATION 1（RDM1）组成的DDR复合体互作，进而转录出支架RNA并招募沉默复合体（RISC）与DRM2来介导DNA甲基化。本试验利用同源克隆OsNRPE1b与DDR复合体中的OsRDM1，并通过Split-LUC技术，验证了OsNRPE1b与DDR复合体的OsRDM1蛋白之间存在相互作用的关系，为探究水稻中的RdDM途径奠定了基础。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1 材料与方法5
1.1 植物材料 5
1.2 载体与菌株 6
1.3构建OsNRPE1bNLuc与CLucOsRDM1载体6
1.3.1 提取RNA6
1.3.2 逆转录6
1.3.3 克隆OsNRPE1b和OsRDM16
1.3.4 琼脂糖凝胶电泳7
1.3.5 胶回收7
1.3.6 同源重组法构建OsNRPE1bNLuc和CLucOsRDM1 7
1.3.7热激法转化大肠杆菌7
1.3.8菌落PCR与菌落备份8
1.3.9 提取质粒8
1.4 烟草瞬时表达实验8
1.4.1 电击法转化农杆菌8
1.4.2农杆菌介导的瞬时表达8
1.4.3 CCD成像9
2 结果与分析9
2.1 OsNRPE1bNLuc与CLucOsRDM1载体构建9
2.2 OsNRPE1b与OsRDM1存在互作 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: #351916072# 
12
3 讨论12
致谢13
参考文献13
表观遗传调控因子OsNRPE1b与OsRDM1蛋白互作验证

原文链接：http://www.jxszl.com/nongxue/zwbh/560695.html