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箭筈豌豆耐寒突变体鉴定【字数:8533】

2024-02-25 11:53编辑: www.jxszl.com景先生毕设
对箭筈豌豆(Vicia sativa L.)低温诱导获得M0代,将M0代播种,收取单株M1代,获得三个箭筈豌豆株系,对各株系进行耐寒性鉴定。结果表明,在低温生长环境,耐寒突变体组的生长性状优于对照组;在经过5天的低温处理之后,各耐寒突变体植株和对照植株的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均明显降低,且二者之间无明显差异;而抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性在经过低温处理后显著提高;而对各株系半致死温度的测定也表明了耐寒突变体植株的耐寒性强于对照组植株。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
1 材料与方法 2
1.1 供试材料及其诱变 2
1.2 株高测定 2
1.3 鲜重测定 2
1.4 CAT活性测定 2
1.4.1 试验试剂 2
1.4.2 试验步骤 2
1.5 蛋白质含量的测定 3
1.5.1 试验试剂 3
1.5.2 试验步骤 3
1.6 SOD活性测定 3
1.6.1 试验试剂 3
1.6.2 试验步骤 3
1.7 APX活性测定 3
1.7.1 试验试剂 3
1.7.2 试验步骤 4
1.8 半致死温度测定 4
1.8.1 样品处理 4
1.8.2 试验方法 4
1.9 数据统计及其分析 4
2 结果与分析 4
2.1 耐寒突变体组与对照组株高的比较 4
2.2 耐寒突变体组与对照组鲜重的比较 5
2.3 耐寒突变体组和对照组CAT、SOD的比较 5
2.4 耐寒突变体组和对照组APX的比较 6
2.5 耐寒突变体组和对照组半致死温度的比较 7
3 结论与讨论 8
3.1 讨论 8
3.1.1 低温胁迫下箭筈豌豆 CAT、SOD 的活性对耐寒能力的影响 8
3.1.2 低温胁迫下箭筈豌豆 APX 活性对耐寒能力的影响 8 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072

3.1.3 低温胁迫下半致死温度对箭筈豌豆耐寒性的影响 9
3.2 结论 9
致谢 9
参考文献 9
箭筈豌豆耐寒突变体鉴定
引言
箭筈豌豆(Vicia sativa L.)是一种重要的饲料作物和绿肥,具有较好的经济效益,是一种一年生、二倍体草本豆科植物,拥有生长周期短、粗纤维含量低、叶片含量多、营养价值高、蛋白质含量高及良好的适口性的特点,因此常被例如牛、羊等所喜食,此外,箭筈豌豆还具有豆科植物的固氮能力、优良的耐寒性和适应性以及改善土壤结构的能力。箭筈豌豆性喜凉爽,拥有耐瘠薄、抗寒、主根粗大等特点,普遍种植于土耳其、南美、中国等地区[16]。亚洲西部及欧洲南部是春箭筈豌豆的原产地。我国在上世纪六十年代开始展开对春箭筈豌豆的整理、利用、试验和育种工作。目前,我国3AAA、西牧324、兰箭3号等春箭筈豌豆品种由中国农科院兰州畜牧所、湖北农科院土肥所、和兰州大学培育而成[7]。
影响植物生长发育和地理分布的其中一个重要限制因素是低温胁迫,该因素的因素主要表现为细胞失水、酶活性变化、膜系统变化,从而引起细胞生理代谢紊乱,更有可能导致细胞死亡。植物的生长温度的差异在很大程度上影响着植株自身的生长发育情况及其生理指标的变化和植株的耐寒性。低温胁迫常常导致植株生长变慢,严重时甚至可能引起冻害和寒害,最后导致死亡。因此,对低温胁迫关于植物生长过程中造成的影响的研究,探讨植株生长过程的抗寒机理,有利于在育种工作过程中提高后代的耐寒性,所以其意义不仅在体现理论基础上,而且还具有处理实际生产中所遇到问题的应用价值。
育种工作其中的一个基本要求是能够保持可遗传的有益变异。体细胞无性系突变技术现已被广泛使用在植物的细胞工程育种,在各类草种质上的运用也有所成效,例如黑麦草、爬跟草、延地青等等[812]。研究进一步表明,在低温胁迫的情况下,植株细胞内活性氧积聚过多,同时细胞膜透性变大,而超氧阴离子在植物细胞中抗氧化的第一条防线超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)的作用下转化为H2O2,紧接着H2O2由能够被过氧化物酶(Peroxidase,POD)所降解,从而降低在植物细胞内活性氧的积累[13]。
本试验对六种箭筈豌豆,通过低温模拟,研究耐寒突变体和对照组在正常和低温情况下的生理反应,对比二者之间SOD、CAT、APX以及其他生理生化指标的差异,并探讨影响植物体耐寒性的生理机制。
1 材料与方法
供试材料及其诱变
以箭筈豌豆种子为材料,先用无菌水冲洗干净之后对其进行消毒灭菌,在培养基上诱导愈伤,等到分化成苗以后,转至MS培养基上培养,作为诱变处理材料。将箭筈豌豆诱变处理得M0代,将MO代播种,收取单株得M1代,分别获得三个株系1G、1R 、2G、2R、和3G、3R。其中1R、2R、3R为耐寒突变组,在低温情况下,叶片保持鲜绿;1G、2G、3G为对照组,在低温情况,叶片变红。
上述种质材料在正常生长温度种植一定时间后,将这些箭筈豌豆植株转移至低温培养箱培养5天。
株高测定
选取处理好的箭筈豌豆植株,测量从根和茎分隔处到该植株最高点的高度,并记录,每个测量做4个重复。
鲜重测定
选取处理好的箭筈豌豆植株,先擦拭根、茎和叶片表面水分,测量该植株的重量,并记录,每个测量做4个重复。

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