本研究以人的肝细胞系为试验材料，旨在探讨二十二碳六烯酸（DHA）对胎牛血清（FBS）诱导肝细胞脂变的作用。体外培养L02肝细胞，采用50% FBS诱导肝细胞脂变后经DHA处理，通过油红O染色与抽提法检测细胞内脂滴含量的变化；通过比色法测定细胞中甘油三脂（TG）及胆固醇（TC）的含量，同时采用Wsetern blot技术分析脂肪生成关键基因PPARγ、C/EBPα和SREBP-1蛋白水平的表达。结果发现，含50% FBS的培养基培养L02细胞48 h，细胞内脂滴数量增多、体积增加，同时TC、TG的含量也显著增加（P < 0.01）。添加DHA可显著降低脂变肝细胞内脂滴、TC及TG含量（P < 0.05）。同时脂肪生成关键基因PPARγ、C/EBPα和SREBP-1的表达显著降低，与模型组相比差异显著（P < 0.05），说明DHA可以有效降低非酒精性脂变肝细胞内脂质含量。
目录
摘要 1
关键词 1
1 材料与方法 2
1.1材料 2
1.1.1主要试剂 2
1.1.2主要器材 2
1.2试验方法 2
1.2.1细胞培养及传代 2
1.2.2细胞冻存 2
1.2.3细胞复苏 2
1.2.4试验分组 3
1.2.5油红O染色及量化 3
1.2.6甘油三酯及胆固醇含量的测定 3
1.2.7 Western Blot 3
1.3数据处理与分析 3
2结果与分析 3
2.1非酒精性脂肪肝模型的建立 3
2.1.1细胞培养 4
2.1.2油红O染色及量化 4
2.1.3甘油三酯及胆固醇含量测定 5
2.2 DHA对非酒精性脂肪肝的治疗作用 6
2.2.1油红O染色检测结果 6
2.2.2甘油三酯及胆固醇含量的检测 7
2.2.3 DHA对脂变肝细胞中脂肪生成相关蛋白表达的影响 8
3讨论 8
致谢 9
参考文献 10
DHA对肝脂变细胞的保护作用研究

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