：细粒棘球蚴病是由细粒棘球绦虫的中绦期幼虫引起的一种在全球广泛分布的人兽共患寄生虫病，已引起多个国家和地区重要的公共卫生问题。近年来科研工作者对该病进行了大量研究，研制出多种与其Eg95蛋白相关的疫苗。在课题开始之前实验室已经成功获得大量GST-Eg95s重组蛋白的表达菌液并离心后取菌泥冷冻保存，基于以上结果，本研究对已表达的菌液进行破碎、层析纯化、脱盐获得GST-Eg95s重组蛋白，对GST-Eg95s重组蛋白进行western-blot鉴定，并对GST-Eg95s重组蛋白液进行酶切和纯化操作去除GST标签蛋白获得Eg95蛋白并用western-blot方法鉴定，利用超虑管对蛋白样进行浓缩获得最终浓度高于10 mg/mL的Eg95蛋白。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法1
1.1实验材料 1
1.1.1 材料1
1.1.2试剂1
1.1.3仪器2
1.2实验方法2
1.2.1试剂配制2
1.2.2菌液处理2
1.2.3 GSTEG95s重组蛋白纯化3
1.2.4重组蛋白GSTEG95s的Westernblot鉴定3
1.2.5 GSTEG95s重组蛋白脱盐 3
1.2.6 酶切去除GST标签蛋白 4
1.2.7 凝胶吸附纯化EG95蛋白4
1.2.8 EG95蛋白的Westernblot鉴定4
1.2.9 浓缩 4
2 结果与分析 4
2.1蛋白的可溶性分析 4
2.2亲和层析结果分析 5
2.3重组蛋白GSTEG95s westernblot鉴定结果 5
2.4脱盐结果分析 6
2.5酶切结果分析 7
2.6 EG95蛋白纯化结果分析 7
2.7 EG95蛋白Westernblot鉴定结果 8
2.8浓缩后蛋白浓度定量分析 9
3 讨论 9
3.1菌液破碎和离
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心 9
3.2 GST亲和纯化柱纯化和脱盐柱脱盐 9
3.3Westernblot鉴定重组蛋白GSTEG95s 10
3.4酶切纯化获得EG95蛋白 10
3.5浓缩获得高浓度EG95蛋白 10
4 小结 10
致谢 10
参考文献10
细粒棘球蚴Eg95蛋白纯化及鉴定

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