野菊花总黄酮挥发油体外抗炎抗过敏活性研究【字数：5487】
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料、试剂和方法 2
1.1.1材料和试剂2
1.1.2仪器2
1.2方法 2
1.2.1总黄酮粗品、挥发油提取2
1.2.2大孔树脂预处理2
1.2.3黄酮粗品纯化2
1.2.4抗炎活性2
1.2.5抗过敏活性3
1.2.6数据处理3
2结果与分析3
2.1抗炎活性3
2.2抗过敏活性6
3讨论7
致谢7
参考文献7
野菊花总黄酮、挥发油体外抗炎抗过敏活性研究
引言
野菊Chrysanthemum indicum L.为菊科多年生草本植物，又名苦薏，传统以其干燥头状花序入药，是我国大多数地区常用中草药之一，在我国均有分布。野菊花在我国药用历史悠久，《本草纲目》记载其对“痈肿、疔毒、瘰疬、眼疱”等有一定功效，《中国药典》（2015年版）一部述其具有清热解毒，疏风平肝的功效[1]。现代药理研究表明，野菊花具有广谱抗菌、抗炎、抗氧化等功效，对心血管疾病、肿瘤及免疫调节等方面有一定疗效，具有极高的药用价值[210]。目前，相关研究大多局限于野菊花化学成分的提取和鉴定，药理研究也集中在抗菌、抗病毒方面。
野菊花主要化学成分有挥发油和萜类、黄酮类、有机酸类等，表现出多种的生理活性，临床应用较为广泛[1]，黄酮类化合物和挥发油是野菊花中的重要功能性成分之一。相关研究表明，野菊花黄酮主要含有木犀草素、刺槐素、蒙花苷等化合物[11,12]，其中蒙花苷和木犀草素可作为 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥
野菊花总黄酮的指标成分[13]。
为了更好地实现野菊花的开发利用，本课题通过野菊黄酮和挥发油的脂氧化酶体外抑制实验、黄嘌呤氧化酶体外抑制实验以及透明质酸酶体外抑制实验，对野菊花的抗炎、抗过敏活性进行了初步探讨。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂和仪器
1.1.1 材料和试剂
供试野菊花取自湖北省阳新县白沙镇（29°95′ N，115°06′ E）。
无水乙醇（分析纯）、甲醇（色谱纯）；S8型大孔树脂；透明质酸酶（hyaluronidase，HAdase） 上海生工生物工程公司、透明质酸钠 上海生工生物工程公司；对二甲氨基苯甲醛 上海Macklin公司、盐酸、醋酸、乙酰丙酮、碳酸钠、无水氯化钙等；亚油酸(Linoleic acid) 上海瑞永生物科技有限公司；黄嘌呤（Xanthine） 合肥博美生物科技有限公司；去甲二氢愈创木酸（Nordihydroguaiaretic acid，NDGA）；别嘌呤醇（Allopurinol）；脂肪氧化酶（Lipooxygenase，LOX） 安徽酷尔生物工程有限公司；黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase，XOD） 上海源叶生物有限公司；氢氧化钠；磷酸二氢钾等。
1.1.2 仪器
16D103 0300电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）；Alpha 1506分光光度仪（上海谱元仪器有限公司）；DNP 9052电热恒温培养箱（上海精宏实验设备有限公司）；UV 1100紫外可见分光光度计（上海美析仪器有限公司）。
1.2 方法
1.2.1 总黄酮粗品、挥发油提取
取200 g干燥样品，加入2 L蒸馏水，4 h回流提取2次，水提液用多层纱布过滤，合并滤液，60℃烘箱烘至浸膏状备用[14,15]；用挥发油测定器收集挥发油，并将收集的挥发油溶于乙酸乙酯，20℃保存，备用。
1.2.2 大孔树脂预处理
用蒸馏水充分淋洗浸泡S8型大孔树脂，除去杂质，75%的乙醇浸泡12 h后，蒸馏水洗至无醇味，并活化树脂。后分别用40 mgL1 NaOH溶液和4%盐酸溶液浸泡4 ~ 6 h，除去杂质，用蒸馏水反复洗涤至中性[16]。
1.2.3 总黄酮粗品纯化
称取20 g浸膏，加入500 mL 70%乙醇充分溶解，常温超声30 min，抽滤合并滤液，得到野菊花总黄酮粗品溶液，将母液经预处理的大孔树脂进行纯化收集，即得样品母液。
1.2.4 抗炎活性
1.2.4.1 脂氧化酶（LOX）体外抑制实验
该实验以亚油酸为底物，在0.150 μgmL1的范围内制备脂氧合酶抑制剂（NDGA，去甲二氢愈创木酸）。将1.5 mL磷酸缓冲液（1/15 M，pH7.5）加入到0.5 mL待测液（其中0.5 mL样品只检查提取物，另0.25 mL样品与0.25 mL NDGA混合来检查样品的协同/拮抗作用），后加入2.5 mL 0.15 mM亚油酸溶液，加入0.5 mL 0.28 UmL1 脂氧化酶（以磷酸缓冲液配制）后开始反应，在234 nm下进行5 min酶动力学的测量。用不加样品的乙醇溶液制备空白对照。
脂氧化酶抑制率计算公式为：
原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/zyx/561527.html
