大叶秦艽中总黄酮提取工艺研究
目 录
1 概 述 1
1.1 大叶秦艽选题目的 1
1.2 大叶秦艽的化学成分 2
1.3 大叶秦艽的药理作用 3
1.4 大叶秦艽中总黄酮的提取工艺 5
2 实 验 7
2.1 试剂与仪器 7
2.1.1 试剂 7
2.1.2 仪器 7
2.2 实验方法 8
2.2.1 样品预处理 8
2.2.2 芦丁标准品溶液的配制 8
2.2.3 显色方法 8
2.2.4 测定波长的选择 8
2.2.5 标准曲线的绘制 8
2.2.6 精密度试验 9
2.2.7 稳定性试验 9
2.2.8 重复性试验 10
2.2.9 加样回收率试验 10
2.3 总黄酮提取工艺的单因素考察 11
2.3.1 乙醇浓度 11
2.3.2 固体与溶剂质量比 11
2.3.3 超声时间 12
2.3.4 超声频率 13
2.4 正交实验 14
2.5 实验结果的稳定性验证 15
3 结 论 17
3.1 结论 17
3.2 存在问题与展望 17
参考文献 18
致 谢 20
1 概 述
1.1 大叶秦艽选题目的
大叶秦艽又名大叶龙胆、西秦艽、龙爪等。大叶秦艽是我国重要的一味传统 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072*
中药,在我国已有近两千多年的用药历史[13]。
秦艽为龙胆科多年生草本植物,其药材分为麻花秦艽、大叶秦艽、粗茎秦艽和小秦艽的根,主要用于治疗风湿性关节炎,低热中风半身不遂 、骨蒸潮热、小儿疳积发热[4]。主要产于我国西部地区几个省份,通常生长在小道两旁、沟渠旁边、或者森林边缘,海拔500~2400米[5]。秦艽的化学成分除环烯醚萜苷类、黄酮类及三萜类龙胆属植物的特征性化学成分外,还含有木脂素类等其他化学成分[6]。
大叶秦艽中含有较多的化学成分,在传统的医学领域,大叶秦艽被赋予了抗病毒、抗氧化和降血糖等药理角色,值得人们广泛研究和发展。大叶秦艽中总黄酮具有很大的药理作用,但如何对大叶秦艽中总黄酮进行有效提取一直是人们研究的热点,本论文的主要目的是对大叶秦艽中的总黄酮进行有效的提取和分离并得到最佳的提取工艺。
总黄酮的提取大多为水提和醇提等,而采用醇提的方法可得到更高的提取效率。本试验过程采用体积分数为95%的乙醇溶液从大叶秦艽中提取总黄酮,以目标产物总黄酮的得率为指标,利用正交设计方法对提取工艺进行优化,确定最优的工艺条件。
总黄酮是大叶秦艽中主要的生物活性物质之一,对大叶秦艽中的总黄酮进行提取一直是人们研究的热点。大叶秦艽的提取大多为水提和醇提等,而采用醇提的方法可得到更高的提取效率。本论文采用95%的乙醇溶液为提取溶剂,并以提取率为指标对提取工艺进行优化,以寻求最佳的提取工艺。
经查阅文献,与其他研究方法结合比较,本课题选用超声波辅助提取法,该方法具有提取效率高的优势,与水提取法,醇提取法相比实验可重复性强,被提取物结构可以高效保留,提取溶剂可以循环使用,设备价格不高、消耗能源小、操作容易,且应用超声提取的药液杂质少纯度高。采用超声波辅助提取法从大叶秦艽中提取黄酮,与回流法相比节约资源、所得产物黄酮质量较高。
本实验以大叶秦艽为实验材料,研究乙醇浓度、固体与溶剂质量比、超声时间和超声频率对大叶秦艽中总黄酮的提取率的影响。
1.2 大叶秦艽的化学成分
关于研究大叶秦艽具有理化活性的化学成分,涵盖了医学、化学和植物学等交叉学科,据报道,大叶秦艽中主要有黄酮类、挥发油类、酚酸及有机酸类氨基酸、微量元素及维生素等。在大叶秦艽的诸多化学成分当中,黄酮类化合物是对医学方面具有很深远影响的研究意义。
(1)总黄酮性质化合物
大叶秦艽叶子中含有5%的黄酮类化合物,主要成分是查尔酮和蒽醌。陈千良等人[78]等人对大叶秦艽进行了提取分离实验,实验结果表明鉴定和分离的结果为提取出了13种黄酮类化合物。孙菁等人[9]等人对大叶秦艽进行了提取分离实验,采用的分离手段是硅胶柱层析及重结晶等实验方法,实验结果为从大叶秦艽中分离得到了金丝桃苷类物质。近藤嘉和[10]等人对大叶秦艽进行了分离实验,采用的实验方法是通过柱层析实验,对提取物进行了分离纯化。肖培根等人的研究表明,秦艽中还含有苦参素、苦参酚、异牡荆素等[11]。
(2)酚酸类性质的化合物
呼延玲等人[12]等人对大叶秦艽进行了分离实验,采用的手段是多种色谱法,分离鉴定出得到的结果是6种酚酸类化合物。
(3)多炔类性质的化合物
研究表明,张益军等人[13]大叶秦艽的氯仿部位可分离得到多炔类性质的化合物;丙酮提取物中可得到3多炔类性质的化合物。
(4)挥发性性质的成分
研究表明,通过水蒸气蒸馏法进行提取,对大叶秦艽中的挥发油进行了分离鉴定,得到了挥发性性质的成分[14]。此外,对大叶秦艽进行了提取和分离实验,手段是蒸馏法,萃取大叶秦艽不同部位挥发油,鉴定出53种成分[15]。
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