响应面法优化超声波提取枸杞中总黄酮工艺研究(附件)
目 录
1 文献综述 1
1.1 引言 1
1.2 枸杞的概述 1
1.2.1 枸杞的来源 1
1.2.2 枸杞的分类 1
1.2.3 枸杞的功效 2
1.3 黄酮的概述 2
1.3.1 黄酮的组成 2
1.3.2 黄酮的性质 2
1.3.3 黄酮的分类 2
1.3.4 黄酮的功效与作用 3
1.3.5 黄酮的药理活性 3
1.4 总黄酮的提取方法 5
1.4.1 溶剂提取法 5
1.4.2 超临界流体萃取法 5
1.4.3 双水相提取法 6
1.4.4 超声提取法 6
1.4.5 微波提取法 6
1.5 选题目的及论文思路 6
2 实验部分 8
2.1 仪器、材料与试剂 8
2.1.1 材料与试剂 8
2.1.2 仪器设备 8
2.2 标准溶剂的配制 9
2.2.1 试剂的配制 9
2.2.2 标准曲线的绘制 9
2.3 方法学考察 10
2.3.1 精密度试验 10
2.3.2 稳定性试验 10
2.3.3 加样回收率试验 10
2.3.4 重复性试验 10
2.3.5 枸杞黄酮的提取工艺 10
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2.4 单因素实验对枸杞总黄酮提取条件的优化 11
2.4.1 乙醇浓度对枸杞总黄酮得率的影响 11
2.4.2 提取时间对枸杞总黄酮得率的影响 11
2.4.3 超声功率对枸杞总黄酮得率的影响 11
2.4.4 液料比对枸杞总黄酮得率的影响 11
2.5 响应面法优化枸杞中总黄酮的超声波法提取条件 11
2.6 枸杞黄酮总得率的计算 12
3 实验结果与分析 13
3.1 芦丁标准曲线的绘制 13
3.2 方法学考察结果 13
3.2.1 精密度试验 13
3.2.2 稳定性试验 13
3.2.3 回收率试验 14
3.2.4 重复性试验 14
3.3 超声波提取过程的单因素实验 15
3.3.1 乙醇浓度对枸杞总黄酮得率的影响 15
3.3.2 超声时间对枸杞总黄酮得率的影响 15
3.3.3 超波功率对枸杞总黄酮得率的影响 16
3.3.4 料液比对枸杞总黄酮得率的影响 16
3.4 响应面试验及结果分析 17
3.4.1 响应面法 17
3.4.2 模型方差分析 19
3.4.3 各因素对提取率影响的响应面图及分析 20
3.5 总结 21
结论 23
参考文献: 24
致谢 26
1 文献综述
1.1 引言
枸杞[1],属于茄科植物,是一种成熟的干燥果实,常以中药来使用。从古到今就受到了人们的关注,是一种药食兼用性的植物。食品上可以用来泡水、熬膏、烹饪等[2];临床上有调节免疫功能、清肺、降血糖、降血脂、明目、保肝和抗肿瘤等作用[3]。枸杞黄酮类化合物在枸杞中的药效还是比较高的。在研究中发现[4],枸杞黄酮类化合物不仅具有平喘、止咳、祛痰的功效,而且可以增强心脏的收缩和降低血胆固醇,可以用于治疗咽喉肿痛、糖尿病、脾胃虚弱、高血压、肝炎、疮病等。因此,众多学者采用回流、微波、双水相等方法来提取枸杞中的黄酮,但提取率较低。本论文将研究一种简单、高效的提取方法,从而提高黄酮的提取率。
1.2 枸杞的概述
1.2.1 枸杞的来源
枸杞这个名称最早是出现在中国二千多年前的《诗经》。明代的药物学家李时珍云:“枸杞,二树名。此物棘如枸之刺,茎如杞之条,故兼名之[5]。”人们日常使用的枸杞子多为宁夏枸杞,因为宁夏枸杞是唯一载入《2010年版中国药典》的品种。宁夏枸杞在中国各地都是有种植的,其主要分布在中国西北地区。枸杞总共分为两大类,一类是商品”枸杞子”,则基本是指宁夏枸杞;还有一类是除西北以外地区的野生枸杞,则基本是指植物枸杞或者北方枸杞。
1.2.2 枸杞的分类
枸杞分为很多物种,包括:中华枸杞、宁夏枸杞、北方枸杞、新疆枸杞、黑果枸杞、云南枸杞等。常见的有中华枸杞和宁夏枸杞两种。
中华枸杞为多分枝灌木,花在长枝上单生或双生于叶腋,在短枝上则同叶簇生, 浆果红色,卵状,栽培者可成长矩圆状或长椭圆状,顶端尖或钝。
宁夏枸杞为灌木,花在长枝上12朵生于叶腋,在短枝上26朵同叶簇生,浆果红色或在栽培类型中也有橙色,果皮肉质,多汁液,形状及大小由于长期人工培育或植株年龄、生境的不同而多变,广椭圆状、矩圆状、卵状或近球状,顶端有短尖头或平截、有时稍凹陷。
1.2.3 枸杞的功效
枸杞味甘、性平。具有补肾益精,护眼明目,补血安神,美容养颜,润肺止咳之功效。《本草纲目》中说:”久服坚筋骨,轻身不老,耐寒暑。”中医常用它来治疗肝肾阴亏、腰酸背痛、头晕目眩、消渴、多忘、遗精等病症。现代药理学研究证实枸杞有滋补肝肾、延缓衰老、降血糖、抗肿瘤、抗肺结核、促进造血功能等方面的作用,并巧妙的应用于临床[6]。
1.3 黄酮的概述
1.3.1 黄酮的组成
黄酮,是黄酮类化合物的总称,泛指两个具有酚羟基的苯环(A与B环)通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物,基本母核是2苯基色原酮类化合物。黄酮类化合物结构中一般连接酚羟基、甲氧基、甲基、异戊烯基等官能团。除此之外,它还常与糖结合成苷。
1.3.2 黄酮的性质
天然黄酮类化合物一般是以苷类形式存在的,并且可以根据糖的种类、数量、联接位置及联接方式的不同组成各种各样黄酮苷类。其中,组成黄酮苷的糖类包括单糖、双糖、三糖和酰化糖。除了黄酮苷固体为无定形粉末,其余黄酮类化合物固体多为结晶性。黄酮类化合物有各种各样的颜色,为天然色素家族添加了更多色彩。这是由于黄酮类化合物母核内形成交叉共轭体系,通过电子转移、重排,使共轭链增长,因此显现出颜色。黄酮苷一般易溶于极性强的溶剂中;但难溶或不溶于有机溶剂中。糖链越长则水溶度越大。黄酮类化合物因分子中多具有酚羟基,因此显酸性,具体酸性的强弱以酚羟基的数目、位置决定。
1.3.3 黄酮的分类
天然黄酮类化合物可以分为很多种,主要有:黄酮类、二氢黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮醇类、花色素类、双苯吡酮类、黄烷3,4二醇类、查尔酮类和双黄酮类等十五种。另外,还有一些黄酮类化合物的结构特别复杂,其中包括榕碱及异榕碱等生物碱型黄酮。
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