本研究随机选择了南京3个奶牛场，采集水槽饮用水和216头奶牛肛拭子进行检测和病原菌分离，旨在了解南京境内奶牛场EHEC O157:H7流行现状。 采集的72个样本（3个肛拭子和1份污水混合物为1个样本）经肉汤培养基（mEC）增菌后， PCR检测rfbE基因、flic基因和Z3276基因，阳性率介于19.44 %～25.00 %；stx2毒力基因的阳性检出率介于2.38 %～69.51 %。将增菌液涂布选择性山梨醇麦康凯平板，挑取可疑菌落和部分发酵山梨醇菌落，通过PCR和生化试验共同鉴定，试验结果显示未分离到EHEC O157:H7。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1样品和菌株2
1.2 培养基及试剂2
1.3仪器和试剂2
1.4 引物的设计及合成2
1.5 样品检测与细菌分离3
1.5.1粪便采集3
1.5. 2 增菌3
1.5.3 菌株分离3
1.5.4 模板制备3
1.5.5 二重PCR反应3
1.5.6 Z3276基因的检测3
1.5.7 stx2基因的检测3
1．5．8 PCR产物的鉴定 3
1．5．9 生化试验 3
2 结果与分析 3
2. 1 增菌液O157:H7阳性率统计 3
2．1．1 增菌液PCR扩增4
2．1．2 增菌液PCR产物的鉴定4
2．2 阳性EHEC O157:H7的鉴定 5
2．2．1 二重PCR扩增5
2．2．2 Z3276基因的检测 5
2．2．3 stx2基因的检测 6
2．2．4 单菌落PCR产物的鉴定6
2．2．5 单菌落生化鉴定6
3 讨论 7
致谢7
参考文献8
南京市奶牛场大肠杆菌O157:H7流行病学调查及菌株分离

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/43621.html