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绿盲蝽乙酰胆碱酯酶a216s突变的lamp检测【字数:7521】

2024-02-25 17:25编辑: www.jxszl.com景先生毕设
【目的】为快速方便地判别绿盲蝽Apolygus lucorum乙酰胆碱酯酶(AChE)第216位氨基酸由丙氨酸到丝氨酸的突变(A216S)。【方法】通过设计特异性引物、摸索反应条件等建立了环介导的等温DNA扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)。【结果】应用LAMP方法检测A216S突变,在恒温条件下60分钟即可完成DNA扩增反应,反应结果直接依据溶液颜色变化加以判定,且在54~66℃的温度范围下均可进行高效率的扩增;应用LAMP方法对田间绿盲蝽种群的A216S突变个体频率进行检测,准确率大于90%。 【结论】LAMP方法的建立为绿盲蝽AChE的A216S突变的分子检测提供了更为快速简便的方法。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 3
1.1供试昆虫 3
1.2 供试试剂 3
1.3 供试仪器 3
1.4 试虫基因组DNA的提取 3
1.5 LAMP方法的建立 4
1.5.1 LAMP引物的设计及合成 4
1.5.2 LAMP反应体系的建立 4
1.5.3 LAMP方法的准确性检测 5
1.6 绿盲蝽种群乙酰胆碱酯酶A216S突变个体频率检测 5
2 结果与分析 5
2.1 绿盲蝽乙酰胆碱酯酶A216S突变的LAMP检测方法 5
2.1.1 LAMP检测体系及反应条件 5
2.1.2 LAMP反应结果 5
2.1.3 LAMP方法的准确性验证结果 6
2.2 我国绿盲蝽田间种群A216S突变个体频率检测 7
3. 讨论 8
致谢 9
参考文献 9
绿盲蝽乙酰胆碱酯酶A216S突变的LAMP检测

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