稻瘟病是影响水稻产量的主要真菌病害，在全世界的水稻产区都有发生，且该病菌的变异性强，这给抗性品种的培育增添了难度，而化学农药的使用会使稻瘟病菌产生抗药性，并污染环境，所以研究稻瘟病菌致病的分子机制，有助于对稻瘟病的防治提供新的思路。在稻瘟病菌侵染水稻的过程中，外泌蛋白发挥重要作用，抑制植物的防卫反应而促进自身侵染；但不同效应分子抑制寄主免疫反应的机制不同，实验前期研究发现稻瘟病菌囊泡转运相关蛋白MoSwa2参与稻瘟病菌致病过程，并影响效应分子的外泌。本文通过收集野生型Guy11和DMoswa2的胞外液通过蛋白质差异组学的方法鉴定到一个受MoSwa2调控的外泌蛋白抗坏血酸氧化酶MoAo1。为了研究该蛋白的功能，本文通过酶切连接的方法构建了其编码基因的敲除载体，并通过同源重组的方法在稻瘟病菌中成功敲除该基因。进一步的致病性分析发现突变体致病力显著下降。为了研究其致病力下降的原因，我们通过酵母双杂交的方法筛选MoAo1在水稻中的互作蛋白，并鉴定到一个与其互作的蛋白，本论文的开展有望为后期研究稻瘟病菌与水稻互作的机制提供帮助。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法4
1.1材料 4
1.1.1研究所需的菌株4
1.1.2研究所需的培养基4
1.2 方法 4
1.2.1载体构建4
1.2.2 稻瘟转化构建突变体5
1.2.3 转化子粗提验证6
1.2.4 转化子精提验证6
1.2.5 敲除突变体致病性分析6
1.2.6 酵母双杂实验6
1.2.7 CoIP验证蛋白互作6
1.2.8 体外Pulldown实验6
2 结果与分析7
2.1稻瘟病菌MoAO1基因的敲除7
2.2稻瘟病菌效应因子MoAo1参与调控稻瘟病菌致病性8
2.3从水稻基因组文库中筛选MoAo1的互作蛋白9
2.4 一对一验证MoAo1与互作蛋白间的互作9
3 讨论10
致谢11
 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: &351916072& 
/> 参考文献11
稻瘟病菌外泌蛋白抗坏血酸氧化酶MoAo1功能研究及其互作蛋白鉴定

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