黄瓜的遗传基础较为狭窄，本试验将EMS诱变得到的黄瓜长瓜把突变体材料与华北型黄瓜品种‘长春密刺’进行了表型对比，对长瓜把突变体的表型进行了鉴定；利用石蜡切片探究了两者细胞组织之间的差异。结果表明长瓜把突变体的瓜把长度是由于细胞体积决定的。对F2分离群体进行了瓜把长度的统计，并利用卡方测验对表型分离比进行了遗传分析，得出结论，瓜把长度这一性状符合孟德尔分离定律，是单隐性基因控制的质量性状。本试验为今后长瓜把性状基因标记开发提供理论基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words 1
引言1
1 材料与方法2
1.1 材料2
1.2 方法2
1.2.1 表型观察法2
1.2.2 石蜡切片法2
1.3 统计分析方法2
2 结果与分析3
2.1 长瓜把突变体和‘长春密刺’的表型差异3
2.2 长瓜把突变体和‘长春密刺’的组织细胞结构差异3
2.3 长瓜把突变体和‘长春密刺’的F2代群体不同表型个体分离比例5
3 讨论6
3.1 长瓜把突变体的表型鉴定及细胞组织差异6
3.2 长瓜把突变体的遗传分析6
致谢7
参考文献7
黄瓜瓜把长度突变体鉴定及其遗传模式研究
引言
黄瓜（2n=14，Cucumis sativus L.），为葫芦科黄瓜属植物，是一种被世界性广泛种植的蔬菜作物。近些年来，随着人们生活质量的提高以及保护地栽培面积的增加，人们对黄瓜果实性状也提出了较高的要求，对瓜把长度[1]、果皮色泽[2]、黄线长[3]、瓜粗、刺瘤颜色[4]、瓜条长[5]等黄瓜的果实性状有所研究。这些性状中，瓜把长度是影响黄瓜果实品质的重要性状之一，在市场调查中，没有瓜把或者瓜把较短的瓜形在市场上更受欢迎。育种工作者想要选育理想中的短瓜把瓜形的黄瓜就需要了解黄瓜瓜把这一目标性状的遗传规律再结合分子标记技术为分子标记辅助育种提供理论基础。
而研究目标性状基因就要利用具有相对表型的材料进行对比分析，在具有相对表型的材料中，利用突变体与野 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: #351916072# 
生型作为相对表型材料的一个优点是突变体与野生型相比只有点突变，排除了其他干扰。在突变体性状研究方面，前人有针对黄瓜叶色[6]、黄瓜耐低温性状[7]、黄瓜耐盐性状[8]的相关文献报道，拓宽了黄瓜的遗传基础，但鲜有黄瓜瓜把长度突变体的研究报道。
诱导构建突变体库的方法有生物诱变、化学诱变、物理诱变。由于EMS化学诱变产生点突变的频率较高，而且染色体畸变相对较少，可以对作物的某一种特殊性状进行改良，且多为隐性突变体，易于进行突变体的筛选，是目前应用最广泛，应用效果最好的一种化学诱变剂[9]。目前，通过EMS诱变已经构建有甜瓜[10]、大麦[11]、六倍体小麦[12]、大豆[13]的突变体库，并对部分性状进行了分析。据前人研究，经过EMS诱导的黄瓜突变体不仅能够应用于理论上的研究，还可以创建出一批优异的育种材料[14]。经过鉴定的可稳定遗传的长瓜把突变体可以作为育种材料，并能够对其与原材料的后代进行遗传分析，为后续的基因定位及功能研究提供了基础材料，本试验以长瓜把突变体为亲本材料之一，进行了表型观察并研究了其遗传模式，为进一步拓宽黄瓜的遗传基础提供理论依据。
在研究植物组织形态时，石蜡切片法是其中一个主要方法，而关于石蜡切片研究的最早的报道是在1950年[15]。石蜡切片制作的玻片标本可长期保存[16]，随着科技不断更新，石蜡切片法也成为我国众多从事科学研究的工作人员研究植物形态时广泛应用的方法。本试验利用了石蜡切片和电子显微镜观察了长瓜把突变体与正常瓜的组织细胞形态差异，为探究黄瓜瓜把长度突变体的细胞学发生模式提供理论基础。
1 材料与方法
1．1 材料
选用以瓜把长度为相对表型的华北密刺型黄瓜‘长春密刺’和长瓜把突变体作为亲本，二者的杂交后代为F1代，进行自交，构建F2代分离群体。其中‘长春密刺’为瓜把较短的品系，长瓜把突变体瓜把较长。所用到的材料均由大学园艺学院黄瓜课题组提供。
1．2 方法
2018年3月于大学白马基地网室播种亲本华北密刺型黄瓜‘长春密刺’和长瓜把突变体及它们的杂交后代F1代种子，F2代种植120株。同年在黄瓜的开花期，早上用同一株上的雄花对植株开花第一天的雌花进行蘸花授粉，挂牌。温度不得超过30℃，才能授粉成功。
授粉成功后再选取不同时期（子房时期，商品瓜时期，成熟瓜时期）的黄瓜对其瓜把及瓜长进行比较观察、测量，对得到的数据进行统计分析。
1．2．1 表型观察法 在不同时期（子房时期，商品瓜时期，成熟瓜时期），分别选取不同株上同一节位的长瓜把突变体和‘长春密刺’果实进行比较，观察表型差异并拍照。在黄瓜植株授粉工作完成后的第0天（子房时期）、第10天（商品瓜时期）、第30天（种瓜时期）分别用直尺测量植株上授粉成功，长势正常，非畸形瓜的黄瓜瓜把长度和果实全长，计算瓜把长度除以总瓜长的比例，记录数据以进行统计分析。
1．2．2 石蜡切片法 由于组织或细胞只能保存很短时间，易腐败变质，不能长时间贮存以进行后续的观察工作，无法观察到原有的形态结构[17]，利用石蜡制片可以很好地解决此问题。石蜡切片法是将材料切成薄片后，以石蜡作包埋剂，经过固定、抽气、洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、修块、切片、粘片、脱蜡、染色、封片等一系列处理制成永久制片的方法。本试验选用子房时期的长瓜把突变体和‘长春密刺’，分别在1/51/7处切取子房组织薄片，分别制作子房横切面、纵切面的石蜡切片。做好后，利用实验室中的显微镜在4x、10x、20x下镜检，采取较好视野对细胞层数和细胞大小的差异进行观察并拍照。
1．3 统计分析方法
量取F2代每一棵植株上的子房、商品瓜以及成熟瓜的瓜把和瓜长后用Excel算出瓜把占瓜长的比例的平均值，再用Excel绘制出每个时期的植株瓜把比例的分布直方图，对比亲本表型数据得到具有长瓜把性状的黄瓜数量，再利用SPSS软件对上述记录的数据进行卡方适合性测验，检验F2代分离群体是否符合3:1比例，即是否符合孟德尔分离定律。
2 结果与分析
2．1 长瓜把突变体和‘长春密刺’的表型差异
在黄瓜的不同发育时期，摘取两个亲本材料相同节位的黄瓜，对比发现，长瓜把突变体的瓜把长度和‘长春密刺’的瓜把长度相比，明显要长。如图1所示，图A、B和C中，左侧均为长瓜把突变体，右侧为野生型‘长春密刺’。如图A所示，在子房时期，可以看到去掉瓜把剩余的地方两者没有明显的长度差异，而瓜把长度差异明显。图B是摘取的商品瓜来进行对比，长瓜把突变体的瓜把长度可近似达到全瓜长的1/3，而‘长春密刺’则只能占到全瓜长的1/51/4。而且长瓜把突变体去除瓜把剩余的部分也略微比‘长春密刺’的长。图C则是在黄瓜的成熟时期摘取的种瓜图片，情况和商品瓜类似，瓜把长度虽然差异明显，但同时瓜长也有所增长。

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