微型月季‘moscow’组培快繁体系的建立【字数：6963】
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
绪论 1
1 材料与方法2
1.1 实验材料 2
1.2 实验方法 2
1.2.1 灭菌处理2
1.2.2 初代培养2
1.2.3 增殖培养3
1.2.4 生根培养3
1.2.5 炼苗与移栽3
2 结果与分析4
2.1 灭菌处理4
2.2 初代培养4
2.3 增殖培养5
2.4 生根培养6
3 讨论 6
4.结论7
致谢8
参考文献8 微型月季‘Moscow’组培快繁体系的建立
引言
引言
月季是蔷薇科蔷薇属植物，是我国十大名花之一。现代月季可分为六大类群: 杂种茶香月季、丰花月季、壮花月季、杂种长春月季、藤本月季以及微型月季[1]。微型月季是所有月季品种里中最小的一种，由多种月季杂交而成，最早在17世纪被培育出。其特点是株型矮小，最高一般不超过30cm[2]；花单生，花朵较小，直径约为2cm~4cm，常重瓣，开花繁多，颜色丰富，排列紧密，耐寒能力强，可以全年开放[34]。
微型月季在观赏方面有极高的价值，在花卉市场占据了一定比例，可应用于观赏盆栽、庭院装饰、花坛花境装点等方面。市场上微型月季常被包装成高档礼品花，畅销欧美 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072*
，仅丹麦一年的微型月季盆花生产量就达到3500万盆[5]。同时，部分富含挥发性物质的微型月季可以用于提取香料、萃取精油等，有很高的经济价值，是重要的花卉资源。
近年来，扦插是大部分月季繁殖的主要方式。常规的扦插繁殖成本低，操作简单，繁殖系数高。但是微型月季株型小，不能获得大量茎段，用扦插繁殖的方式生产反而成本高、效率低下。早在1980年，Hasegawa以攀援月季‘Improved Fire’的茎尖和休眠芽为材料，在MS培养基上建立了试管苗无性系，开辟了月季组培的先河[6]。就目前来说，西方如美国、丹麦等花卉产销大国在微型月季从育苗到产后处理都有更加标准化的操作流程。国内在月季组培方面多是研究切花月季，对微型月季的研究已有雏形，但大都是针对微型月季这一类群的研究，细化到各个品种后的资料文献少之又少，且尚没有比较成熟的全套技术可应用于规模化的商业性生产[7]。
目前组培各阶段培养基所需物质及大致比例已经可以确定，但是细化到每个品种上又会产生一定的差异，尚没有适用于全部微型月季组培快繁的培养基配方，而针对品种的培养基配方的资料也尚待完善，这一部分还需要更细致的研究。而且，激素的配比对微型月季的生理有着极大的影响，不适宜的激素比例会引起微型月季玻璃苗、黄化、褐化等问题，甚至导致死亡。
所以，研究微型月季组培快繁体系的建立，为不同月季品种建立独立的体系，可以促进微型月季组织培养效率提升，减少生产成本，为不同品种微型月季工厂化育苗供理论依据。
本实验以微型月季‘Moscow’为实验材料，通过探究其外植体消毒所需试剂浓度及其处理时间、各阶段最佳培养基配比，来建立微型月季‘Moscow’的组培快繁体系，同时为其他品种组培快繁体系提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
以大学园艺学院月季课题组提供的微型月季‘Moscow’作为实验材料，取其带腋芽的茎段作为外植体进行实验。
1.2 实验方法
1.2.1 灭菌处理
由于氯化汞毒性强，易对外植体造成伤害，且易造成环境污染，相比之下，次氯酸钠具有更环保、灭菌效果好、性价比高等的优点，因此本实验以次氯酸钠溶液为灭菌剂，探究其最佳工作浓度和最佳处理时间。
以微型月季‘Moscow’的茎段作为实验材料。先将实验茎段去除叶片清洗干净，根据芽的分布修剪成25cm的茎段，茎段的底端呈45°斜角，上端平整，每段茎上留12个腋芽。用流水冲洗剪好的茎段2h左右后，移入超净工作台。
将次氯酸钠溶液分为2%、5%、8%的浓度梯度，按无菌水洗1min，75%酒精洗30s，次氯酸钠溶液洗5min，无菌水洗4次，每次1min的顺序进行灭菌。将灭菌后茎段接入培养基，每瓶培养基接入4个茎段，每个变量做3瓶，7d后观察灭菌情况。以上实验重复3次。
待确认灭菌效果最佳的次氯酸钠溶液浓度后，按上述操作，用最佳浓度的次氯酸钠溶液，以5min，8min，10min的处理时间梯度对茎段进行处理，接入培养基内，每瓶培养基接入4个茎段，每个变量做3瓶，37d观察灭菌情况。重复3次。
本实验以统计的茎段污染率、褐死率和存活率来比较各灭菌剂浓度和灭菌时间的灭菌效果。
1.2.2 初代培养
初代培养是使茎段上的腋芽发育成丛芽的培养。
将最适合木本植物生长的MS培养基作为基础培养基，把6BA的浓度设置为三个梯度，分别为0.1mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L，再分别与浓度为0.1 mg/L、0.5 mg/L的NAA溶液交叉组合，所有培养基中都添加0.4 mg/L浓度的GA3，制成如表1的6种初代培养基。
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