本试验以微型月季‘Roma’为试材，研究了不同灭菌组合，在初代培养、增殖培养和生根培养中不同植物生长调节剂种类和浓度对‘Roma’组培快繁的影响，以期建立微型月季‘Roma’的组培快繁体系。结果表明进行‘Roma’外植体灭菌的适宜组合是8%次氯酸钠处理5 ~ 8 min，污染率和褐死率都在较低水平。在组织培养过程中，最适宜进行初代培养的GA3浓度为1.5 mg/L，萌芽率为100%，平均芽长2.33 cm，腋芽生长势良好；最适宜的增殖培养基配方为MS + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L和MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L，增殖系数为3.20 ~ 3.67，组培苗平均株高为2.82 ~ 3.20 cm，增殖苗生长健壮；最适宜的生根培养基为1/2 MS + NAA 0.3 mg/L，生根率为75.00%，平均生根数为5.17。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 材料 2
1.2 方法 2
1.2.1 外植体的灭菌处理 2
1.2.2 初代培养 2
1.2.3 增殖培养 2
1.2.4 生根培养 2
1.2.5 移栽成苗 2
1.3 统计分析 3
2 结果与分析 3
2.1 次氯酸钠溶液浓度和处理时间对外植体灭菌效果的影响 3
2.2 不同浓度GA3对‘Roma’初代培养的影响 4
2.3 增殖培养 5
2.4 生根培养 6
3 讨论与结论 6
致谢 8
参考文献 8
图1 不同初代培养基下‘Roma’外植体生长状态 5
图2 不同增殖培养基下‘Roma’的增殖状态 6
图3 ‘Roma’组培快繁体系 8
表1 灭菌处理的正交设计 3
表2 不同的初代培养基 3
表3 不同的增殖培养基 3
 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072* 
表4 不同的生根培养基 3
表5 不同灭菌处理对‘Roma’外植体灭菌效果的影响 4
表6 不同初代培养基对‘Roma’初代培养的影响 5
表7 不同增殖培养基对微型月季‘Roma’增殖培养的影响 5
表8 不同生根培养基对微型月季‘Roma’生根培养的影响 6
微型月季‘Roma’组培快繁体系的建立
引言
引言
微型月季(Rosa hybrida)是蔷薇科多年生木本植物，由原产我国的小月季于18世纪传入欧洲后经漫长的杂交选育形成，并逐渐成为现代月季的六大类群之一。微型月季株型细小，花色丰富，可多季节重复开放，观赏期长[1]。随着人们生活质量逐渐提高，人们对家庭园艺的热情日益高涨，如何在有限的空间布置更多的植物进行装饰，小巧精致的微型月季慢慢地进入人们的视野，成为家庭园艺等日常园艺设计的热门植物。在现代微景观制作、园林景观布置、立体绿化等产业也能看到微型月季被大量的采用，同时，微型月季亦是广大花店、年花市场的热销品，深受人们喜爱[2]。
微型月季主要是通过扦插进行繁殖，但由于微型月季株型矮小，可用于扦插繁殖的有效茎段较少，加之还受不良环境条件影响，易受如红蜘蛛、白粉病等病虫害侵染，短时间内难以获得大量高质量的种苗，故使用扦插繁殖不利于进行微型月季的工厂化生产[3]。相比传统的扦插繁殖，组织培养具有繁殖率高，新苗性状稳定，出苗整齐度高，繁殖周期短等特点，是今后微型月季快速繁殖技术的首选[4]。早在上世纪80年代就开始了对月季进行组培快繁的研究[5]，组培快繁技术趋于成熟。通过建立微型月季的组培快繁体系，实现微型月季工厂化大规模生产，以满足不断上涨的微型月季市场需求。
本试验以粉花微型月季品种‘Roma’为研究材料，探讨使用组织培养技术进行微型月季的快速繁殖，通过在外植体灭菌、初代培养、增殖培养和生根培养过程筛选出符合要求的处理，从而建立‘Roma’的组培快繁体系，为其它微型月季品种组培快繁体系的建立提供一定的参考，推动微型月季工厂化生产的发展。
1 材料与方法
1.1 材料
微型月季‘Roma’由大学园艺学院月季课题组提供。本试验以微型月季植株的茎段为主要试验材料，进行组培快繁。
1.2 方法
1.2.1 外植体的灭菌处理
选取芽饱满，无病虫害的健康的当年生枝条，使用带1~2个芽的茎段作为外植体。将剪取得到的茎段置于流水下冲洗2~4 h，然后转移到装有无菌水的烧杯中并于超净工作台中进行紫外线灭菌20 min。随后使用75 % 酒精振荡清洗30 s，将清洗完的茎段按表1的组合方式进行灭菌处理，待灭菌处理完后用无菌水振荡清洗5次，每次清洗至少2 min。用刀切除茎段形态学下端的发黑部分，随后将完成灭菌处理的茎段接入MS培养基中进行培养，每个灭菌处理接种4瓶，每瓶接种4个茎段，重复3次，每天观察并按时记录茎段污染率，褐死率及芽诱导情况，连续观察14 d。计算公式如下：
污染率 = 污染茎段数/接种数×100 %；
褐死率 = 褐死茎段数/接种数×100 %；
萌芽率 = 腋芽已萌发的茎段数/接种数×100 %。
培养条件：室温（25±2）℃，每天光照12 h。下同。
1.2.2 初代培养
将完成灭菌的茎段接入含有不同浓度GA3的初代培养基（表2）中进行腋芽萌发诱导。初代培养基以MS为基本培养基，其中添加蔗糖 30 g/L、琼脂8.0 g/L、pH 5.8 ~ 6.0。每个处理接种4瓶，每瓶接种4个茎段，重复3次，每天观察茎段的存活率及腋芽诱导情况和萌发的腋芽的长度，连续观察14 d，按时进行数据记录与统计。
1.2.3 增殖培养
切取初代培养得到的长约2 cm的生长健康的腋芽，接入含有不同浓度6BA与NAA的增殖培养基（表3）中进行增殖培养。增殖培养基以MS为基本培养基，其中添加蔗糖 30 g/L、琼脂8.0 g/L、pH 5.8 ~ 6.0。每个处理接种6瓶，每瓶接种2个腋芽，重复3次。每天观察腋芽的生长情况，并于20 d后记录各处理的增殖系数。

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