本研究以二倍体不结球白菜（Brassica campestris ssp. chinensis）‘紫菜薹’为材料，分别采用浓度为0.1%、0.2%和0.3%的秋水仙素溶液对二倍体‘紫菜薹’茎尖生长点进行4次点滴处理，鉴定筛选同源四倍体‘紫菜薹’并进行二、四倍体‘紫菜薹’的生理生化指标比较。结果显示，同等条件下，浓度为0.2%的秋水仙素溶液对‘紫菜薹’的诱导效果最好，诱导率为6.62%。二、四倍体植株品质比较发现，四倍体‘紫菜薹’的游离氨基酸、叶绿素总浓度分别比二倍体植株增加了288.82%、110.02%；但硝态氮、可溶性蛋白、维生素C、可溶性糖、纤维素总含量分别比二倍体植株减少了48.99 %、50.96 %、45.17 %、44.50 %、57.1 %。秋水仙素诱导‘紫菜薹’的最适浓度为0.2%，四倍体‘紫菜薹’总体营养品质低于二倍体‘紫菜薹’。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1．1 试验材料 2
1．2 试验方法 2
1. 2. 1 诱导方法 2
1. 2. 2 叶绿素含量测定方法 2
1. 2. 3 可溶性糖含量测定方法 3
1. 2. 4 硝态氮含量测定方法 3
1. 2. 5 蛋白含量测定方法 3
1. 2. 6 氨基酸含量测定方法 3
1. 2. 7 维生素C含量测定方法 3
1. 2. 8 纤维素含量测定方法 4
1. 3 数据分析 4
2 结果与分析 4
2．1 不同浓度秋水仙素处理诱变效果 4
2．2 二、四倍体‘紫菜薹’叶绿素含量比较 5
2．3 二、四倍体‘紫菜薹’营养品质比较 5
2 .3 .1 可溶性糖含量 5
2 .3. 2 硝态氮含量 6
2 .3. 3 可溶性蛋白含量 6
2 .3. 4 氨基酸含量 7
2 .3. 5 维生素C含量 7
 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072* 
2 .3. 6 纤维素含量 8
3 讨论 8
致谢 9
参考文献 10
不结球白菜二四倍体‘紫菜薹’的诱变及生理生化指标比较分析
引言
引言
不结球白菜（Brassica campestris ssp.chinensis Makino）原产于中国，栽培种植历史悠久，是我国长江流域最大众化的蔬菜作物之一，也是秋冬季节重要的蔬菜。近些年来，东南亚、日本、美国及欧洲一些国家也开始广泛引种，使得不结球白菜逐渐成为世界性蔬菜。同时，不结球白菜的研究也已引起国内外众多学者的高度重视，我国不结球白菜的分子研究已达到世界先进水平[1,2,3]。
自然界中某些二倍体物种（2n=2x）由于自然或人为因素的作用，使染色体呈倍性增加，形成的含有3套及以上染色体的新物种称为多倍体。多倍体植物与二倍体相比，通常会表现出外形巨大，有效成分含量增加，抗逆性和适应性显著增强等优势[4]。根据育种目标的需求，利用人工诱导或自然变异等，使细胞染色体组加倍从而获得多倍体植株的育种方法，称为多倍体育种[5]。多倍体在自然界中较为常见，一般情况下多倍体植株具有器官巨大、营养品质提高等显著特性，也引起众多研究人员及学者研究植株多倍体育种。
‘紫菜薹’（Brassica campestris L. ssp. chinensis var. purpurea Tsen et Lee）为一、二年生草本植物，是中国特产蔬菜，为湘、鄂、川等长江流域一种重要的秋冬蔬菜。其称谓主要在于植株叶片的颜色绿中带红或紫色，叶脉叶柄及菜薹的外皮为红色或紫色[6]。‘紫菜薹’含有丰富的维生素、氨基酸、硝态氮、可溶性糖和可溶性蛋白等营养物质。可溶性糖、可溶性蛋白是人体不可或缺的营养物质，维生素C能够抑制自由基的形成，保护人体防御系统[7,8]。因此也成为长江流域受欢迎的蔬菜之一。
目前‘紫菜薹’的植物学特性、栽培技术以及生长环境要求均已为人们所熟知，但多倍体‘紫菜薹’的相关研究未见报道。因此本试验将对二倍体‘紫菜薹’进行秋水仙素处理，诱导其染色体加倍，获得多倍体‘紫菜薹’。参照前人用秋水仙素溶液处理植物并进行诱导加倍的结果，如：徐丽娟等人诱导不结球白菜‘依玲’发现使用浓度为0.2%的秋水仙素溶液进行4次处理后的诱导效果最好，得到四倍体加倍率为7.64%[9]，张蜀宁等对萝卜进行四倍体诱导发现使用浓度为0.15%的秋水仙素溶液处理4次时诱导效果最好，二倍体植株的加倍率为8.6%[10]。本试验设置了三个梯度处理浓度，即浓度为0.1%、0.2%和0.3%三种浓度的秋水仙素溶液，分别对子叶期‘紫菜薹’茎尖生长点处理4次，尝试诱导获得四倍体‘紫菜薹’植株，并比较四倍体‘紫菜薹’及二倍体‘紫菜薹’的生理指标及营养品质。
1 材料与方法
1．1 试验材料
以大学园艺学院白菜系系统生物学实验室提供的二倍体不结球白菜‘紫菜薹’（2n=2x=20）为实验材料。本试验在大学白菜系统生物学实验室句容基地进行。
1．2 试验方法
2. 1 诱导方法
2016年9月，将二倍体材料‘紫菜薹’播种于72孔的穴盘内，使用基质配方为蛭石:草炭=3:1，待‘紫菜薹’幼苗子叶完全展开时，用配置好的秋水仙素溶液点滴‘紫菜薹’幼苗的子叶生长点，并于上午9:00、下午17:00各处理1次，每次处理约滴200 μL的溶液，秋水仙素溶液浓度分别设置为0.1%，0.2%和0.3%，点滴蒸馏水作为空白对照，每个浓度的秋水仙素处理均进行四次。
2. 2 叶绿素含量测定方法
叶绿素含量测定方法采用王学奎[11]的方法。在植株嫩叶期，随机选取二、四倍体‘紫菜薹’植株同等部位的新鲜叶片各0.2 g，先用蒸馏水把叶片清洗干净，再用去离子水冲洗两次，随后用无菌滤纸吸干叶片表面水分，将叶片剪碎放到一干净试管中，此处避开了叶片大叶脉处。加入少量石英砂以及碳酸钙粉，再用移液枪吸取25 mL的提取液（丙酮:无水乙醇=1:1）加到试管中，在避光条件浸提，多次摇动试管，直到叶片完全变白。再采用分光光度计测量法分别测定663 nm，645 nm波长下的吸光度，按照公式Ca = 12.7 × OD663 2.59 × OD645；Cb = 22.9 × OD645 4.67 × OD663（OD表示吸光度）计算叶绿素含量。每个处理设置三次重复进行试验。

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