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不同外植体及培养基对果梅初代组织培养及不定芽的形成的影响【字数:6631】

2024-02-24 17:32编辑: www.jxszl.com景先生毕设
果梅(Prunus mume Sieb. et Zucc.)是我国具有悠久发展历史和远大发展前景的果树品种,果梅再生体系的建立具有重要研究意义。本文将从果梅外植体消毒方法,不同外植体及培养基对果梅初代组织培养及不定芽形成的影响、激素和其他添加物的作用等方面对果梅枝条初代组织培养体系建立的方法进行研究,最终确定2号初代培养基1/2MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA + 1.0 g/L PVP + 30 g/L蔗糖 + 7g/L琼脂,最适合果梅的初代培养,其不定芽产生率较高,对后续进行继代等研究奠定了一定的基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言(或绪论)1
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.2 方法 2
1.2.1 外植体的处理3
1.2.2 培养方法3
1.3 数据统计与分析3
2 结果与分析3
2.1 不同培养基对茎尖初代培养效果的影响3
2.2 不同培养基对茎段初代培养效果的影响4
2.3不同外植体的培养效果4
3 讨论 5
3.1 消毒方法5
3.2 激素与其他添加物的作用5
3.3 外植体褐化及其解决途径6
3.4 玻璃化现象其解决途径6
致谢6
参考文献7
不同外植体及培养基对果梅初代组织培养及不定芽形成的影响
引言
引言
果梅(Prunus mume Sieb. et Zucc.)又名青梅。在植物分类学上属于蔷薇科李属,果梅在中国已有上千年的应用历史,是一种来自中国的重要核果类树种,同时按照使用目的的不同可分为花梅和果梅两大类。中国果梅资源非常丰富,较其他国家来说,仅本土记载的就达190个品种与优株,还有大量野生果梅资源有待挖掘。
梅有很强的药用价值,《神农本草经》中说:“梅实味酸平,主治下气,除热烦满,安心,止肢体疼,偏枯不仁,死肌,去青黑痣,蚀恶肉。”明代药物学家李时珍认为梅能“敛肺涩肠 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072
,止久嗽泻痢,反胃噎膈,蛔厥吐利,消肿涌痰,杀虫,解鱼毒,马汗毒,硫磺毒”。梅果因此又被人们赞誉为“健康食品”。果梅蕴含有机酸、维生素、氨基酸和黄酮等多种人体内必需的保健物质。其中的苏氨酸等8种氨基酸和黄酮等物质,是构成人体蛋白质的重要材料,保证人的代谢的正常进行,同时可预防心血管等疾病的产生。近代医学表明,果梅能开胃散郁,生津化痰,活血解毒,其根研末可治黄疸,并有杀菌效果,能够有效抑制大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、霍乱弧菌等。
果梅具有较高的经济价值。果梅主要分布于我国云南和长江流域,是云南省进入国际市场的果品之一,也是高海拔、气候寒冷的山区主要经济来源的重要树种之一。果梅因有机酸含量高、含糖量低,因此很少直接食用,绝大部分果实供加工用。早在商代,人们就将梅子当醋用以调羹汤,将梅果制成各种食品,如蜜饯、梅干、梅酒、梅酱、青梅汁等。新鲜果梅经过多重工艺的综合加工,配制成风味独特,深受人们喜爱,而且有多种药效的保健饮品果梅酒。果梅酒还可以作为果品加工厂加工果品的防腐剂、调味剂等。果梅加工品独特的优良风味和便于贮藏和运输的优点,使其适宜在偏远地区发展,是老、少、边、贫地区脱贫致富的门路之一[9]。
鉴于果梅在我国的发展优势,以及其超高的营养健康价值、经济价值和生态价值,果梅产业具有远大的发展前景。果梅的品种选育、品质改良及繁育乃是果梅品质研究和产业发展的重要研究问题。通常果梅采用实生苗选种、杂交育种等方法来进行品种选育和品质改良,利用嫁接、扦插等无性繁殖方式来进行繁育[3]。这些方法普遍存在花费时间较长、耗费较大、局限性大,易受季节、气候影响等缺点。利用离体繁殖技术可以很好地解决这些问题。
果梅离体繁殖技术研究是研究果梅生长和分化规律的重要手段。组织培养是生物学上应用非常广泛的生物技术,将其应用于核果类果树遗传育种,不仅可以克服远源杂交中的不亲和现象,并且能够大大缩短育种时间。此外,利用组织培养以及转基因技术的研究,可以打破传统育种技术固有的局限,通过基因工程等技术,提高品种的抗性、产量、质量[8]。而得到转基因植物首先需要建立在一个高效的植株再生体系,其中器官发生和体细胞胚发生是植株再生的主要途径[5]。
果梅再生体系的建立将有利于果梅繁殖育种途径的拓宽,为优质果梅种苗的大规模培育提供新的技术支撑。为开展果梅相关基因工程的各项基本技术,如基因转移和基因重组等技术奠定基础。通过这些技术的应用可以快速繁殖种苗,培育无病毒种苗、选育新品种、保存人工种子和种质资源、工业化生产药用产品和次生物质等。综上所述,果梅再生体系的建立具有重要的科研价值和意义。
木本植物的离体培养相较于草本植物相对复杂,这是由于木本植物高度杂合的的自然遗传特性和较长的生长周期。但也正是因为这样,木本植物的离体培养成果所带来的价值更高于草本植物。木本植物的离体培养在我国的开始时间为20世纪70年代,在刚开始的培养材料只主要为花药,此后逐渐范围扩大到体细胞的离体培养。近几十年来,伴随着植物组织培养的迅速发展,木本科的离体培养也渐渐有所突破, 叶片、茎尖、茎段、胚、子房、胚乳、花药以及游离细胞和原生质体等均可作为外植体,成功培育出再生植株[4]。
1 材料与方法
1.1 材料
以果梅品种“酸梅”的茎尖和带芽的茎段为研究材料。
1.2 方法
1.2.1 外植体的处理 取当年新生直径2~3mm的枝条为外植体,放入清水瓶中在室内养护1~2d;先用饱和的洗衣粉水泡洗20~40min,再以流动的自来水冲洗外植体10~20min。将枝条修剪为1~2cm的茎段,每个茎段上带一到两个叶片,并将叶片修剪至0.5cm2左右。同时取枝条顶端的0.5~1cm的茎尖,保留一到两片细嫩的叶片。处理好后带入无菌室;在超净工作台上,用无菌滤纸吸干水分,然后用75%乙醇消毒40~60s,无菌水冲洗两次;用0.1%升汞表面消毒7min,无菌水冲洗5~6次。为防止酒精和升汞处理后的两端部分坏死,影响接种结果,用灭菌剪刀或刀的切除茎段和茎尖消毒后略有发黑的形态学下端0.1~0.2cm即可,注意保持切口整齐干净。

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