半夏在我国有着丰富的野生资源，其染色体数目差异较大，染色体数20-100不等，染色体多倍性表现在基数多样性与倍性多样性两方面，染色体基数包括7、8、9、13等，大部分学者认为13为半夏唯一的染色体基数。半夏中存在整倍体与非整倍体。本实验采用改良苯酚品红染色、显微镜观察法观察半夏根尖染色体数，分析不同产地半夏染色体数目，半夏染色体数在云南、贵州、四川具有较大的多样性。各地半夏染色体数目有较大差异，同一省份半夏染色体数存在差异，不同产地半夏染色体数又存在相同的状况，染色体数目不同的半夏，其叶片厚度、叶型、株高存在差异，为半夏细胞学研究、选育半夏优良种质提供理论依据。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
前言3
1 材料与方法3
1.1 材料3
1.2 观察半夏根尖染色体数4
1.2.1取样4
1.2.2冰冻4
1.2.3 固定4
1.2.4 解离 4
1.2.5制片4
1.2.6 敲片4
1.2.7 观察 4
1.2.8 计数4
2 结果与分析4
3 讨论 7
3.1半夏染色体数类型7
3.1.1 半夏染色体数7
3.1.2半夏染色体数的多倍性7
3.2半夏染色体数类型的地理分布7
3.2.1半夏地理分布8
3.2.2商品半夏的分布8
3.3半夏染色体数类型与表型差异8
3.4半夏染色体数类型与育种8
3.5半夏染色体数与质量检查9
致谢9
参考文献10
不同产地半夏染色体数目鉴定
中药学 崔英静
引言
半夏Pinellia ternata(Thumb.) Berit来源于天南星科半夏属，其块茎入药，辛、温，有毒，归脾、胃、肺经，可燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结等[1]，全国除内蒙古、新疆、青海、西藏未发现野生种，各地均有分布[2]。半夏染色体数目变化广，倍性复杂，导致半夏生物 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ￥351916072$ 
形态及其化学成分含量差异较大。为了更好的选择优秀的半夏种质并确保半夏质量、保证半夏的疗效，需从遗传方面分析不同产地半夏倍性及其生物形态和成分的差异。本实验收集中国各地半夏种子，采用显微镜观察的方法测定不同产地半夏根尖染色体数，为细胞分类学、半夏育种提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
本实验收集来自全国不同产地的半夏种子或种苗，经大学园艺学院中药系向增旭教授鉴定为半夏Pinellia ternata(Thumb.) Berit[1]，播于大盆中，每盆保证有6~10个植株。放于阴凉处生长，每周浇水适量，定时清理杂草、枯叶、已死亡或生长不良的植株，保证植株生长良好。半夏块茎主要生长在茎近土处。当半夏植株因特殊原因枯死时，可以利用其块茎繁殖，保证材料不缺失。每盆需做好标记，防止材料混乱。半夏适应较强，不需要特殊管理，注意在半夏倒苗前将半夏移入室内，保证半夏生长，倒苗后半夏根尖不再生长，无法取样。
1.2 观察半夏根尖染色体数
本实验采用显微镜观察法鉴定不同产地半夏根尖染色体数目。由于时间原因，观察江苏盐城、重庆历州、湖北荆州、湖北枝江、湖北、湖南常德、湖南吉省、四川南充、河南蒿县、贵州凯里、甘肃陇南宕县、云南文山的半夏根尖染色体数。半夏根尖染色的基本步骤是半夏种植—根尖取样—冰水处理—固定—解离—染色—制片—观察。
1.2.1 取样 植物根尖生长分裂迅速，有丝分裂分为间期、前期、中期、后期、末期，其中处于分裂前期、中期的细胞较方便观察染色体，根据实验结果，上午8:009:00，选择实验盆中生长旺盛的半夏植株，挖出[3]。半夏根尖较脆，挖取半夏植株时，注意不要将半夏根尖扯断。取其根尖，随着根尖不断生长，细胞不断成熟，细胞壁增厚，生出根毛，不利于制片观察，因此取样部位需控制在0.5cm以内。为了取样方便，切取其泛白根尖2~3cm，一般2~3个，取好后立即放入水中，防止根尖干燥，除去挖出植株上已经切取根尖的根，将挖出的半夏植株栽于小盆中，浇水，放于阴凉处，使其根系继续生长，保证实验材料充足。取样一次后，半夏根尖实验材料均取于小盆中植株，大盆植株留样，保证实验材料的完整；
1.2.2 冰冻 洗净后及时放入装有去离子水的离心管中，放于冰水中，冷冻24h；冰水处理可以使处于分裂期的细胞染色体收缩紧密，有助于观察。当天气炎热时，半夏根尖分裂减慢，即使在上午8:009:00取样，染色效果亦不理想，此时可适当延长半夏根尖冰冻时间。对于冰冻的半夏根尖可以长时间保存；
1.2.3 固定 卡诺试液处理（无水乙醇：冰醋酸=3:1）已冰冻的根尖6~8h，卡诺试液要现配现用；用后放于冰箱中冷藏；配置卡诺试液，口鼻需离试剂口较远，防止因冰醋酸的刺激性受伤。固定后的根尖可以长时间保存；
1.2.4 解离 经固定后的根尖清水洗净，0.1M稀盐酸处理[4]，60℃水浴，6~8min，清水涮洗；盐酸可以溶解细胞壁之间的果胶物质和部分细胞质，在敲片时使细胞更加分散，便于观察[4]。解离使用实验室提供的0.1M稀盐酸，解离好的根尖呈半透明状并软化，不同粗细的根尖，完全解离所需时间不同，为了使细胞充分解离，可以适当延长解离时间。若解离时间过长，会导致细胞中的染色体散出，所得染色体数少于实际染色体数，实验结果少于实际染色体数，根据课题组经验，解离时间控制在6~8min，随着半夏根尖的粗细适当延长。0.1M稀盐酸可重复利用，节约试剂。
1.2.5 制片 将解离后的根尖放于载玻片上，吸水纸吸干。切取根尖泛白处约1mm，滴2~3滴染色剂，染色剂要将根尖没过，完全浸染，罩好，染色≥1h[5]；敲片,注意力度与频率，不可将盖玻片敲碎，或用力过大导致染色体缺失；也不可过轻，导致细胞重叠影响观察，要有较大的熟练度，每次制作2~3个，保证准确度，减少误差；
1.2.6 观察 将制备的玻片于显微镜下观察，选择视野中染色体染色明显且分布分散，细胞质不被染色，细胞轮廓明显、清晰、完整的图片拍照，保存；
1.2.7 计数 准确计数，以所计染色体数目最大的为最终结果。
2 结果与分析

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/zyx/607298.html