可替宁羟化酶的鉴定与功能研究【字数:9739】
目录
摘 要 II
关键词 II
ABSTRACT III
KEY WORDS III
1 引言 1
1.1 可替宁的概述 1
1.1.1 可替宁的简介 1
1.1.2 可替宁污染的广泛存在 1
1.1.3 可替宁的危害 1
1.1.3 可替宁环境中降解的研究进展 2
1.2 研究目的意义及内容 3
2 材料与方法 3
2.1 实验材料 3
2.1.1 菌株和质粒 3
2.1.2 试剂、仪器和培养基 4
2.2 实验方法 4
2.2.1 重组菌株的功能验证 4
2.2.2 重组菌株的诱导与表达 7
2.2.3 菌株HZN7pBBRncotA1A2A3粗酶液特性研究 8
3 结果与分析 9
3.1 重组菌株功能验证 9
3.2 重组菌株降解代谢产物的鉴定 10
3.3 粗酶酶学特性研究 11
3.3.1 NCOTA1A2A3的活性 11
3.3.2 NCOTA1A2A3的酶含量活测定 11
3.3.3 NCOTA1A2A3的酶动力学参数 12
4 讨论 13
致谢 14
参考文献 14
附录1:仪器设备 17
附录2:文中所用试剂配方 18
附录3:缓冲液 20
可替宁羟化酶的鉴定与功能研究
摘 要
可替宁(Cotinine)是尼古丁在人体内进行初级代谢后的主要产物,主要存在于血液中,随着代谢过程从尿液排出,由于可替宁的半衰期较长且较稳定,因此成为众多检测的生物标志物。同时已有相关研究表明可替宁具有增加人类冠心病发病率等众多危害,而可替宁污染广泛存在于环境水体中,其对生态环境和人类健康有潜在威胁,故开展可替宁在环境中降解转化的相关研究非常有必要。本研究在实验室前期研究工作基础上,对催化可替宁降解关键步骤的可替宁羟基化酶的基因进 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: @351916072@
行异源表达和功能验证,并探讨了该羟化酶的酶学特性,以期揭示可替宁的微生物降解代谢过程和分子机理。
原文链接:http://www.jxszl.com/swgc/smkx/606515.html