树突状细胞是目前所知的功能最强的抗原递呈细胞，是唯一一种沟通先天性免疫和获得性免疫的桥梁。禽流感病毒中H9N2在鸡树突状细胞上的复制受到显著的抑制。非编码RNA中的miRNA在调控树突状细胞的发育和抗原递呈能力的同时，也可以调控禽流感病毒的复制。因此可以从miRNA的层面入手研究鸡的树突状细胞抑制禽流感病毒复制的分子机制。通过miRNA过表达载体的构建、流式细胞、荧光定量PCR、miRNA对应的靶基因野生型和突变型表达载体的构建、双萤光素酶报告基因法验证互作、证明了miRNA对树突状细胞在免疫功能的影响极有可能是通过与树突状细胞上的miRNA的靶基因结合位点结合，抑制靶基因的转录和表达，并且相互作用产生一系列效应，来增强树突状细胞免疫功能，进而抑制禽流感病毒的复制，具体机制需要深入研究，但为合理的开发新型非编码RNA预防禽流感病毒提供了重要的理论依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words 1
引言（或绪论）1
1 材料与方法2
1.1 实验材料2
1.1.1 试剂及耗材2
1.1.2 主要仪器3
1.2 实验方法4
1.2.1构建产生显著差异的miRNA的表达载体 4
1.2.2通过利用流式细胞技术验证筛选MicroRNAs与树突细胞表型的相关性 4
1.2.3通过荧光定量PCR方法检测禽流感病毒的复制是否受到影响 5
1.2.4筛选显著差异的miRNA对应的靶基因 5
1,2.5构建筛选显著差异的miRNA对应的靶基因野生型的表达载体 5
1.2.6利用双萤光素酶报告基因法验证软件预测的MicroRNAs与禽流感病毒靶基因的互作相关性 7
2. 结果与分析 7
2.1 构建产生显著差异的miRNA的表达载体 7
2.2 流式细胞技术结果9
2.3 荧光定量PCR实验结果9
2.4 筛选显著差异的miRNA对应的靶基因 11
2.5 构建筛选显著差异的miRNA对应的靶基因突变体的表达载体 11
2.6 构建靶 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
基因突变型的表达载体 13
2.7 双萤光素酶报告基因法验证结果 14
3.讨论 14
致谢 16
参考文献 16
鸡GgamiRNA调控激活鸡树突状细胞的免疫功能的研究

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