野生大豆百粒重相关基因的克隆和功能研究【字数:8274】
目录
摘 要 II
关键词 II
ABSTRACT III
KEY WORDS III
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 植物材料及试剂载体 2
1.2 GsMLP基因的克隆 2
1.3 GsMLP基因的生物信息学分析 3
1.4 野生大豆与同源栽培豆GsMLP基因组织表达模式对比分析 3
1.5 极端材料差异表达分析 4
1.6 pMDC83载体的构建 4
1.7 GsMLP亚细胞定位的预测 4
2 结果与分析 4
2.1 GsMLP基因的克隆 4
2.2 GsMLP基因的生物信息学分析 5
2.2.1 GsMLP基因结构和保守结构域分析 5
2.2.2 GsMLP基因启动子顺式作用元件分析 6
2.2.3 野生大豆GsMLP蛋白多重序列对比与进化树分析 7
2.2.4 野生大豆MLP基因家族进化树及基因结构分析 8
2.3 野生大豆与同源栽培豆GsMLP基因组织表达模式对比分析 8
2.3.1 利用生物信息学分析组织表达模式 8
2.3.2 实验分析野生大豆GsMLP基因组织表达模式 10
2.4 极端材料差异表达模式分析 11
2.5 GsMLP亚细胞定位预测 12
3 讨论 12
致谢 14
参考文献 15
野生大豆百粒重相关基因的克隆和功能研究
摘 要
百粒重是影响大豆单产的重要农艺性状。野生大豆(Glycine soja)是栽培大豆的近缘野生种,往往具有农艺性状优良的基因。从野生大豆中挖掘和利用优良基因,一直是拓宽栽培大豆遗传基础,提高大豆产量的重要途径之一。MLP(Major latex protein)蛋白是一种植物特有的乳胶蛋白,在植物发育和各种应激反应中发挥着重要作用,但MLP蛋白与野生大豆百粒重相关,尚未有人报道。前期通过东北野生大豆自然群体关联分析获得一个 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072^
与百粒重相关的位点,本研究在此基础上挖掘并克隆了1个MLP同源基因,命名为GsMLP,该基因组全长1175bp,包括462bp的编码区,编码154个氨基酸。利用实时荧光定量PCR技术对GsMLP在9个野生大豆极端材料和同一材料不同组织中的表达情况进行分析,结果表明,GsMLP在百粒重较小的极端材料中表达量最高;在不同组织中GsMLP基因在荚中的表达量最高,在茎中的表达量次之,根及叶中表达微量,在种子中基本不表达。亚细胞定位分析预测该基因位于细胞外。本文初步探讨了GsMLP如何影响野生大豆百粒重的作用机理,为从野生大豆中获得优异基因进行栽培大豆的遗传改良提供分子基础。
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