目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1实验材料 2
1.1.1材料来源2
1.1.2常用培养基2
1.1.3主要仪器设备3
1.1.4常用试剂3
1.2实验方法 3
1.2.1菌株C. globosum CDW7的液体发酵3
1.2.2有机溶剂萃取3
1.2.3 1MT转化产物的分离与鉴定3
1.2.4抑菌、除草活性测定4
1.2.4.1 植物病原真菌抑制活性测定4
1.2.4.2 细菌抑制活性测定4
1.2.4.3 除草活性测定4
2结果与分析5
2.1化合物结构解析5
2.1.1化合物15
2.1.2化合物25
2.1.3化合物36
2.1.4化合物47
2.1.5化合物57
2.1.6化合物68
2.2化合物抑菌、除草活性测定结果9
2.2.1化合物抑制植物病原真菌活性9
2.2.2化合物抑制细菌活性9
2.2.3化合物除草活性10
3讨论 11
致谢11
参考文献12球毛壳菌对1甲基L色氨酸的生物转化产物研究
摘 要
微生物转化法是利用微生物细胞将复杂的底物进行结构修饰，即利用微生物在代谢过程中产生的某个或某系列酶，对底物特定部位或基因进行的催化反应。球毛壳菌（Chaetomium globosum）是一种代谢产物非常丰富的植物内生菌。甲基化的色氨酸生物活性丰富且具有吲哚结构，可以进行多种结构修饰，转化后的产物还可以继续参加到多种生物反应中。本文研究的即是球毛壳菌对1甲基L色氨酸（1MT）生物转化的产物，经过分离鉴定共得到6个化合物。其中，化合物2对抑制水稻纹枯病菌（Magnaporthe oryzae）有较好的效果，抑制活性达51.8%；化合物6对水稻细菌性条斑病菌（Xanthomonas *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072^ 
oryzae pv. oryzicola, Xoc）抑制活性较好，MIC值为32μg/mL；化合物2对稗草、醴肠等杂草的除治具有一定的应用潜力。
引言
利用微生物转化法对底物进行结构修饰及改造，为新药物寻找先导化合物，是现阶段新农药研发的主要途径之一。
微生物转化也称为绿色生物反应，它是利用微生物细胞将复杂的底物进行结构修 饰，即利用微生物代谢过程中产生的某个或某一系列酶 ，对底物特定部位（基因）进行的催化反应[1]。相较于其它转化技术，微生物转化具有反应更温和、过程更简单、选择性及特异性更强、效率更高等优点，目前已在诸多领域得到充分应用[2]。同时，微生物转化技术的环境危害程度基本为零，很好地契合了现阶段的环保理念，是一个高生态效益的绿色化学反应过程，因此具有非常良好的应用前景。
球毛壳菌（Chaetomium globosum）是一种常见的植物内生真菌。它不但本身具有生防作用，可以抑制许多病原菌的增长从而增加作物产量，而且还能产生丰富的具有独特结构及多种生物活性的次级代谢产物[3]。例如，球毛壳菌素A（chaetoglobosin A）具有强烈的杀线虫能力，LC50为77.0 μg/mL，其效果跟市售的杀线剂克百威（carbofuran）相当[46]；此外球毛壳菌素A对立枯丝核菌和腐霉菌等植物病原菌有非常强的抑制和杀菌效果[7]。球毛壳菌素是球毛壳菌产生的次生代谢产物中非常重要的一大系列化合物，其具有的吲哚基结构取代了原来细胞松弛素中苯基的位置，统计显示，至今已从球毛壳菌中分离出六十多种此类化合物。其不但结构表现出多样性还具有良好广泛的生物活性[810]。
甲基化的色氨酸不但生物活性丰富，并且由于具有吲哚结构的特点，可以进行多种结构修饰，转化后的产物还可以继续参加到多种生物反应中。
基于以上，本实验选用Chaetomium globosum CDW7进行液体发酵，过程中投喂1甲基L色氨酸进行微生物转化，使用硅胶柱、凝胶柱层析技术、高效液相色谱等对化合物进行分离纯化，并通过波谱数据分析对分离得到的化合物进行结构鉴定，并对部分化合物进行生物活性测定。我们期待以此获得一些结构新颖、对植物病原菌有较好抑制作用的化合物，为开发绿色新型生物农药提供依据。
1 材料与方法
1．1 实验材料
1.1.1 材料来源
（1）植物内生菌Chaetomium globosum CDW7以及生测使用的植物病原菌，均由大学植物保护学院天然产物与农药化学实验室提供。
（2）杂草种子由植物保护学院除草剂毒理及抗性实验室提供
单子叶杂草 稗草（Echinochloa crusgalli）
双子叶杂草 醴肠（Eclipta prostrata）
（3）1甲基L色氨酸来自SigmaAldric公司。
1.1.2 常用培养基
（1）改良查氏培养基（Modified Czapek’s Medium）：3克NaNO3 ，1克K2HPO4 ，0.5克MgSO4 ，0.5克KCl ，0.01克FeSO4 ，1克酵母浸膏，30克蔗糖，20克琼脂，加水溶解至1000mL，分装后121℃灭菌20min后备用。
（2）NA培养基：称取10克蛋白胨，3克牛肉粉，5克NaCl ，15g琼脂，加水定容至1000mL，加热至琼脂完全融化，摇匀，分装，封口，于121 ℃条件下高温灭菌30min。

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