目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法1
1.1生物材料 1
1.2菌株和质粒 1
1.3培养基和抗生素2
1.3.1培养基2
1.3.2培养条件2
1.3.3抗生素2
1.4 cRNA表达质粒的构建2
1.4.1引物设计与合成2
1.4.2稻黄单胞菌DNA的提取 2
1.4.3 PCR扩增及回收 3
1.4.4重组质粒的构建 3
1.4.5感受态的制备 4
1.4.6大肠杆菌 DH5α转化4
1.4.7重组质粒的验证4
1.4.8质粒的提取 4
1. 5 cRNA的体外合成 4
1. 6 cRNA的完整性检测 5
1. 7爪蟾卵母细胞的制备 5
1. 8爪蟾卵母细胞的显微注射 5
1. 9 sux基因蔗糖吸收能力测定 6
2结果与分析 6
2.1 cRNA表达质粒的构建 6
2.2 cRNA的完整性检测6
2.3 sux基因蔗糖吸收能力测定 7
3讨论 8
致谢9
参考文献10
水稻白叶枯病菌蔗糖转运蛋白的功能研究
摘 要
水稻白叶枯病（Bacterial leaf blight, BLB）由水稻白叶枯病菌致病变种（Xanthomonas oryzae pv.oryzae, Xoo）引起。Xoo中由hrp（Hypersensitive response and pathongenicity）基因簇编码的Ⅲ型分泌系统向寄主分泌的TAL效应物（Transcription activator Like effector）可诱导编码寄主蔗糖转运蛋白的SWEET（Sugars Will Eventually be Exported Transporters）基因的表达，进而使细菌从寄主中获取蔗糖。蔗糖的获取和代谢对细菌 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072* 
的致病性具有决定作用，细菌挟持寄主的蔗糖转运蛋白已有文献报道，但病原菌自身对蔗糖的利用途径上不清楚。前期研究发现Xoo中存在的sux (sucrose utilization in Xanthomonas)基因簇与细菌毒力相关，我们推测该基因簇中有两个基因suxA、suxC共同组成了一个完整的蔗糖转运通道，还有一个suxB基因功能为水解蔗糖为单糖，进而为细菌所利用。为了验证转运通道的组成，说明三个基因的产物在爪蟾中同样具有运输蔗糖的作用，本实验通过体外转录的方法合成了cRNA，在爪蟾卵母细胞中表达后，对爪蟾卵母细胞吸收蔗糖的能力进行了测定。已取得的部分实验数据显示，单独表达suxA时，蔗糖溶液中的细胞发生收缩。同时表达suxA、suxC两个基因或加上suxB 基因时，细胞直径则增大。我们的研究结果可初步证明sux基因组成了完整的蔗糖转运通道，能够在爪蟾卵母细胞中参与蔗糖的吸收。

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