目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言2
1材料与方法2
1.1实验材料和仪器2
1.1.1实验材料 2
1.1.2主要试剂 2
1.1.3主要仪器 2
1.2实验方法 3
1.2.1包被原与免疫原的制备3
1.2.2小鼠免疫3
1.2.3融合小鼠的选择3
1.2.4杂交瘤细胞的制备4
1.2.5单克隆抗体的大量制备6
1.2.6单克隆抗体的亚型鉴定6
1.2.7单克隆抗体的纯化7
1.2.8单克隆抗体的稳定性分析7
2结果与分析7
2.1融合小鼠的选择7
2.2杂交瘤细胞株的筛选8
2.3单克隆抗体的亚型鉴定9
2.4单克隆抗体的稳定性分析9
3讨论9
致谢9
参考文献9
附录A 试剂配方11
附录B 杂交瘤细胞亚克隆筛选效价检测数据表12
梨火疫病菌的单克隆抗体的筛选
摘 要
本实验以梨火疫病菌(Erwinia amylovora)菌体作为免疫原，对6~8周龄BALB/c雌性小鼠进行免疫注射，并定期抽取小鼠尾血制得抗血清用于间接ELISA法检测效价。筛选出效价更高的小鼠后，取其脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，继而获得可以持续产生梨火疫病菌抗体的杂交瘤细胞株。而后对杂交瘤细胞株进行筛选和单克隆化，得到检测病原效果最佳的杂交瘤细胞单株，以及相应的单克隆抗体。单克隆抗体的亚型检测结果为IgM型，稳定性良好，可用于梨火疫病菌的免疫检测，为之后检测产品的研发提供参考。

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