目录
摘要2
关键词2
Abstract3
Key words3
引言4
1 材料与方法5
1.1 培养基、实验菌株与抗生素 6
1.2 菌种活化 7
1.3 酶和引物 7
1.4 T/A克隆7
1.5大肠杆菌感受态的转化7
1.6质粒提取7
1.7芽孢杆菌的转化7
1.8菌落PCR与突变体验证8
1．9荧光假单胞菌2P24的AHLs信号粗提液制备8
10 AHLs降解酶活性的检测8
1.10.1原理8
1．10．2实验步骤9
1．10．3 实验现象9
结果与分析9
2.1 yfiN基因的序列同源性分析 9
2.2△yfiN突变载体pMyfiNCm的构建10
2.3 Bs916突变体△yfiN的构建及转化子验证..10
2.4 Bs916突变体△yfiN对AHLs的降解活性的检测..11
3讨论 11
3.1 微生物与植物跨界信号的研究11
3.2芽孢杆菌产生的抑菌物质种类及其活性12
致谢13
参考文献13
图1 yfiN突变载体pMyfiNCm的构建示意图10
图2 Bs916突变体△yfiN的PCR验证10
图3 Bs916突变体△yfiN的对AHLs的降解能力验证11
表1 实验所用培养基名称及其配方6
表2 本实验所用引物6
表3 各片段PCR扩增程序7
枯草芽孢杆菌Bs916中yfiN基因的突变和功能初步研究
摘 要
在生物防治的方法中，生防菌的研究和使用正在良好发展，其中芽孢杆菌因其高产，易培养，遗传背景研究深入等特点而备受关注，包括我国在内的多个国家已研发以芽孢杆菌及其产物为主的生物制剂。通过研究芽孢杆菌的遗传背景和作用机理，以枯草芽孢杆菌Bs916为例,Bs916上的yfiN基因可能是调控AHLs *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072# 
群体感应淬灭酶的关键基因。群体感应现象是细菌快速适应周围环境，表达生物学性状，从而获得较高的侵染力，致病性的重要影响因素。AHLs是病原菌中的群体感应系统中的关键信号分子，通过降解AHLs能降低群体感应现象的程度，进而降低病原物致病性。本实验首先构建了枯草芽孢杆菌Bs916的突变体△yfiN，再利用生物检测法明确了突变体△yfiN对AHLs的降解能力的影响。结果显示：正常Bs916菌株能高效分解AHLs信号分子，而缺失了yfiN基因后部分影响生防芽孢杆菌Bs916对AHLs的分解能力。本研究初步明确枯草芽孢杆菌Bs916中的yfiN基因对病原菌的群体感应具有间接调控作用，为芽孢杆菌的生物防治机制拓展了新的思路。

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