目录
摘要Ⅱ
关键词Ⅱ
AbstractⅢ
Key wordsⅢ引言1
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.2 实验方法 2
1.2.1 初代培养2
1.2.1.1 外植体灭菌2
1.2.1.2 愈伤组织诱导2
1.2.1.3 转化培养3
1.2.2 继代培养3
1.2.3 茎段生根3
1.2.4 杜梨抗性评价方法4
2 结果与分析4
2.1 初代培养4
2.1.1 不同消毒浓度对杜梨外植体的影响4
2.1.2 不同激素浓度对杜梨愈伤组织诱导率的影响4
2.1.3 转化培养基的筛选5
2.2 继代培养5
2.3 茎段生根培养6
2.4 杜梨抗性评价时间6
3 讨论 7
致谢8
参考文献10
杜梨组织培养与抗病诱导的研究
摘 要
梨火疫病菌是我国一类进境检疫危害性有害生物，防控十分困难。培育相对抗病的品种和砧木是防治火疫病最有效的方法之一。本研究以建立杜梨无菌繁殖体系，用无菌培养杜梨植株建立室内致病性测定方法，同时为室内周年取得试验材料目标，克服自然生长植物材料取样季节性限制，并利用愈伤组织细胞变异，建立植物抗病性病原菌诱导工作方案。本研究从外植体选择、愈伤组织诱导、再生植株培养等方面，进行培养条件选择，初步建立杜梨快速繁殖技术体系，同时，建立了无菌杜梨叶片致病接种，以及病原菌与愈伤组织共培养进行抗病诱变方法，结果表明：杜梨启动培养基1/2 MS+TDZ 3.0mg/L；转化培养基1/2 MS+6BA 0.5mg/L；继代培养基1/2 MS+6BA 0.4mg/L+IBA 0.4mg/L。生根培养基1/2MS+NAA 0.5mg/L或1/2 MS+IBA 0.2mg/L均优于其它配比；杜梨叶片接种72小时可以进行抗性评价时间。杜梨愈伤组织与梨枝枯病菌共培养，可以获得成活组织，并消除病菌，本研究实现了梨树叶片周年确样，为杜梨室内抗性选育提供参考。
引言 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072* 

梨火疫病原菌为解淀粉欧文氏菌(Erwinia amylovora)，其寄主广泛，蔓延速度快，可危害苹果、梨及蔷薇科等220余种植物，是我国进境植物检疫性有害生物之一。该病原菌引起的病害常具有毁灭性，最早于1780年在美国纽约附近被发现，随着国际贸易的流通，病害已广泛分布于美国、欧洲等四十多个国家和地区，造成了严重的经济损失。到目前为止，我国还未发现梨火疫病的发生[1]。在其防治措施中，培育相对抗病的品种和砧木是防治火疫病最有效的方法之一。根据田间调查结果分析发现，由于砧木杜梨对该病害比接穗更为敏感，因此，提高杜梨的抗病能力，对该病害的防控尤其重要。果树具有很多种育种途径，包括诱变育种、芽变选种、杂交育种以及倍性育种等，由于最终育种主要依赖田间的选择，因此，存在梨组培育种的周期长，效率低等的缺点。
目前，梨组培快速繁殖已逐渐地引起了人们的重视和关注，如何有效缩短梨组培育种的时间和提高梨组培育种的效率已逐渐成为我国梨树组培育种技术工作者长期努力追求的战略目标[2]。
杜梨(Pyrus betulifolia Bunge)，别名棠梨，具有耐盐碱的气候特点，抗寒抗干旱的能力强，是目前我国北方地区种植梨树的主要原料和砧木。杜梨为蔷薇科梨属，常生于北方地区海拔50~1800m的丘陵平原或山坡上，在长江流域以及辽宁南部、河北、湖北、甘肃、陕西等地区均有分布[3]。由于杜梨对我国白梨、砂梨、秋子梨三个系统的品种都十分具有亲和力，目前杜梨已成为我国北方地区梨树砧木的首要原料和选择[4]。
然而，杜梨多通过种子进行繁殖，而其常规育种及栽培周期长，繁育的下一代遗传性状易发生变异，对于抗性品系的培育是很大的难题，严重时会影响梨果实的产量与品质。组织培养依赖于“植物细胞全能性”，在很大程度上规避了田间繁殖的很多不便之处，能够在一定程度上实现大量梨组培优良品种的快速繁殖与应用推广。
目前，梨的组织培养技术在世界范围内已具有广泛的发展，大部分组织培养都集中在叶片以及茎尖培养两个方面。研究结果表明，对于不同品系的植物组织，即使是相同品系的不同外植体材料，实验所采用的培养基种类、植物生长激素以及细胞分裂素的配比和浓度、培养的相关条件等因素也并不相同[5]。由于杜梨的不定根发生的能力相对较弱，属于生根较难的果树品种，如何有效提高优选杜梨砧木插条以及生根能力是目前我国果树栽培领域技术研究的重点之一。
本研究拟通过对杜梨无菌组织培养的最适消毒杀菌浓度和时间、各阶段最适培养基的筛选以及茎段生根的最佳植物激素配比等方面进行探究，初步获得最优、最快的组培繁殖体系，为田间具有抗病株系的繁殖推广提供技术支持。此外，通过梨树组织培养材料接种梨火疫病菌，观察发病程度随时间的变化，从而了解杜梨抗性评价的时间，完善抗病水平评估。
1 材料与方法
1．1 供试梨材料
在库尔勒香梨栽培园区，选择无病害、生长健壮的砧木杜梨，于12月中下旬采摘长度约为30 cm的越冬休眠枝条。将摘取的枝条表面尘土清洗后晾干，插入装有水且深度为1/3枝条长度的组培容器中，待越冬休眠芽萌发并抽出新枝、长出嫩叶后作为外植体材料。

原文链接：http://www.jxszl.com/nongxue/zwbh/607387.html