目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1 材料与方法2
1.1 实验试剂与器材2
1.1.1 实验试剂2
1.1.2 实验器材2
1.2 供试菌株与质粒2
1.2.1 菌株与质粒2
1.2.2 菌株的培养与保存2
1.3 培养基与抗生素2
1.3.1 培养基2
1.3.2 抗生素3
1.4 构建Pf5菌株luxR2150缺失突变体3
1.4.1 Pf5菌株基因组的提取3
1.4.2 PCR扩增与回收4
1.4.3 连接5
1.4.4 转化5
1.4.5获得突变体Pf5Δ21508
1.4.6 菌落PCR验证8
1.5 构建Pf5菌株luxR2150回补体8
1.5.1 PCR扩增与回收8
1.5.2 连接8
1.5.3 转化9
1.5.4 获得回补体Pf5Δ2150C9
1.6 发酵产物的提取9
1.7 排油圈实验10
1.8 崩塌实验10
1.9 Pf5菌株luxR2150突变体、回补体、野生型的生物膜表型检测10
1.10 Pf5菌株luxR2150突变体、回补体、野生型的群集运动表型检测10
2 结果与分析11
2.1 Pf5Δ2150突变体的构建11
2.1.1 敲除载体的验证11
2.1.2 Pf5Δ2150突变体的验证11
2.2 Pf5Δ2150C回补体的构建11
2.2.1 回补载体的验证11
2.2.2 Pf5Δ2150C回补体的验证12
2.3 LuxR2150基因能调控Pf5菌株脂肽类粗提物的表面活性能力12
2.4 LuxR2150对生物膜的影响13
2.5 LuxR2150对群集运动的影响14
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3 讨论15
致谢16
参考文献17
LuxR2150调控生防假单胞菌Pf5菌株的脂肽化合物orfamide A合成的机理研究
摘 要
生防假单胞菌（Pseudomonas spp.）是一种典型的植物根围促生细菌，由于其能够为植物提供多种抗生性次级代谢产物，目前已被陆续应用于促进生物防治方向的发展，尤其是生防菌剂的开发及应用等方面。生防假单胞菌Pf5菌株能够产生脂肽化合物orfamide A，前期生物学分析发现，此化合物的合成操纵子ofa的下游存在一个功能未知的转录调控因子luxR2150。本课题构建其敲除突变体Pf5Δ2150以及回补体Pf5Δ2150C，菌株生物学表型检测结果显示，敲除突变体Pf5Δ2150的脂肽化合物生成量明显降低，生物膜厚度较野生型降低，同时突变体Pf5Δ2150的群集运动能力也有所下降，将2150基因回补后，相关表型能得到恢复。因此推断，luxR2150基因能够有效影响生防假单胞菌生物膜及群集运动的表型，其影响机制可能为调节脂肽化合物orfamide A的生成。通过对此脂肽化合物的研究，扩展对其调控机理的认识，将为后续的生防假单胞菌生防机制研究提供新思路和新途径。

原文链接：http://www.jxszl.com/nongxue/zwbh/607335.html