二化螟是水稻上的一种重要害虫，转Bt水稻的种植可以有效减轻二化螟等鳞翅目靶标害虫的暴发危害，为水稻鳞翅目害虫的防治提供了新途径。然而，大气CO2浓度升高等全球气候变化问题给转Bt水稻带来了较多的生态问题。大气CO2浓度升高影响转Bt作物的外源Bt蛋白含量，进而影响其靶标抗虫性。本研究测定了CO2倍增下分蘖期转Bt水稻的Bt蛋白表达量，二化螟4龄幼虫取食转Bt水稻后的死亡率、相对生长速率及取食转Bt水稻不同时间（0、1、2、3、4 d）后虫体内总蛋白酶、类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶和氨肽酶活性变化及虫体内Bt蛋白含量。结果表明1)与对照CO2处理相比，倍增CO2显著降低了分蘖期转Bt水稻Bt蛋白含量。2）二化螟四龄幼虫取食转Bt水稻19天后，死亡率达到100%。对照CO2下取食转Bt水稻二化螟半数致死时间（3.76 d）显著短于倍增CO2下（6.29d）。3）取食转Bt水稻的二化螟死亡率与和相对生长速率均与转Bt水稻Bt蛋白含量成正相关。二化螟的致死中时间与转Bt水稻Bt蛋白含量呈负相关。4）取食转Bt水稻后，二化螟体内中肠蛋白酶和类胰蛋白酶活性随着取食时间的延长而降低，而类胰凝乳蛋白酶活性在取食后升高。倍增CO2处理下，二化螟取食转Bt水稻4d后中肠蛋白酶活性和类胰蛋白酶活性显著高于对照CO2处理。5）取食转Bt水稻后，二化螟体内氨肽酶活性增高。二化螟取食转Bt水稻4d后氨肽酶活性显著高于对照CO2处理。6）ELISA测定结果显示，取食转Bt水稻的二化螟幼虫Bt蛋白含量随取食时间的延长而降低。与对照CO2相比，倍增CO2显著降低了取食转Bt水稻2d的二化螟幼虫Bt蛋白含量。根据本研究结果可知，CO2浓度升高会降低分蘖期转Bt水稻Bt蛋白含量，延长二化螟存活时间。在未来大气CO2升高情况下，二化螟可通过改变体内蛋白酶活性来应对转Bt作物Bt蛋白的含量变化。
目录
摘要1
Abstract1
引言2
1 材料与方法3
1.1 CO2浓度设置3
1.2 供试水稻及昆虫4
1.3 主要试剂耗材及仪器设备4
1.4 二化螟生物测定4
1.5 试虫收集4
1.6 二化螟相对生长速率测定5
1.7 二化螟中肠蛋白酶及氨肽 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: #351916072# 
酶活性测定5
1.7.1 中肠酶液的制备5
1.7.2 可溶性蛋白含量测定 5
1.7.3 中肠总蛋白酶活性测定 5
1.7.4 类胰蛋白酶活力测定 6
1.7.5 类胰凝乳蛋白酶测定 6
1.7.6 氨肽酶（APN）活性测定 6
1.8 Bt蛋白摄入量测定 6
1.9 数据统计分析 7
2 结果与分析 7
2.1 CO2浓度升高对转Bt水稻外源Bt蛋白含量的影响 7
2.2 CO2浓度升高对取食转Bt水稻的二化螟死亡率的影响 7
2.3 CO2浓度升高对取食转Bt水稻的二化螟致死时间的影响 8
2.4 CO2浓度升高对取食转Bt水稻的二化螟相对生长速率的影响 8
2.5 对照和倍增CO2浓度下转Bt水稻外源Bt蛋白表达量与二化螟致死率、致死中时间和相对生长速率的相关性分析9
2.6 CO2浓度升高对取食转Bt水稻的二化螟中肠总蛋白酶活性的影响9
2.7 CO2浓度升高对取食转Bt水稻的二化螟类胰蛋白酶活性的影响10
2.8 CO2浓度升高对取食转Bt水稻的二化螟类胰凝乳蛋白酶活性的影响11
2.9 CO2浓度升高对取食转Bt水稻的二化螟氨肽酶活性的影响11
2.10 CO2浓度升高对取食转Bt水稻的二化螟Bt蛋白摄入量的影响 12
3 讨论 12
致谢13
参考文献14
CO2浓度升高对转Bt水稻靶标抗虫性的影响

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