目录
摘要1
关键词1
Abstract2
Key words2
引言3
1材料与方法4
1.1植物材料 4
1.2实验方法 4
1.2.1 Cm4CL2基因克隆4
1.2.2系统进化树分析5
1.2.3 Cm4CL2在不同组织中的表达特性5
1.2.4 Cm4CL2响应蚜虫取食的表达模式分析6
1.2.5 pBIGCm4CL2转基因菊花‘神马’鉴定6
1.2.5.1 载体构建6
1.2.5.2菊花遗传转化与鉴定7
1.2.6木质素含量测定7
2结果与分析7
2.1 Cm4CL2基因克隆及序列分析7
2.2系统进化树分析8
2.3 Cm4CL2在不同组织中的表达特性9
2.4 Cm4CL2响应蚜虫取食的表达模式分析9
2.5 pBIGCm4CL2转基因菊花‘神马’鉴定10
2.6Cm4CL2 转基因植株木质素含量测定 11
3讨论 12
致谢13
参考文献13
附录A cDNA的合成15
附录B 转化大肠杆菌感受态16
附录C 农杆菌感受态细胞的制备及转化16
附录D 农杆菌转化菊花17
菊花木质素合成相关基因Cm4CL2的克隆与功能鉴定
摘要
本文旨在克隆菊花木质素相关基因Cm4CL2，并对其功能进行鉴定，分析其在菊花不同组织和蚜虫胁迫中的表达特性。对菊花‘神马’中木质素合成路径的基因Cm4CL2 的ORF全长为1,629bp，编码542个氨基酸；系统进化分析表明菊花Cm4CL2与向日葵的Ha4CL2基因亲缘关系最近，氨基酸序列同源性为85.89%；组织定量分析显示，Cm4CL2在菊花‘神马’叶部表达量最高，茎部次之，根部最少；在蚜虫胁迫下，Cm4CL2被诱导表达，但前期响应不明显，24h时出现明显高峰；超表达转基因株系中Cm4CL2表达量明显高于野生型；在Wiesner染色反应中，切片染色面积明 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072* 
显较对照组扩大，且染色程度加深。综上所述，本研究初步证明了在菊花‘神马’中Cm4CL2影响木质素的合成，可能与菊花对蚜虫的机械防御有关。

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