菊花基因CmERF3属于植物ERFs转录因子亚家族中的成员。现在关于ERFs转录因子的相关报道主要集中在钻研植物对干旱、水淹、盐碱、高温、病虫害等非生物和生物胁迫响应，及植物生长发育过程方面。而目前对菊花CmERF3的功能研究仍未见报导。为探究CmERF3的生物学功能，本实验通过使用研究蛋白质相互作用的方法——酵母双杂交技术筛选菊花花芽分化的cDNA文库，并将筛出来的候选基因采用酵母双杂交及烟草的双分子荧光互补（BiFC）实验验证。本次实验共筛出98个显蓝的阳性克隆，其中测序获得次数最多的基因为在拟南芥中已被报道具有调控开花功能的基因STPP，及响应生物与非生物胁迫的基因ERD15；STPP与CmERF3在酵母中互作很强，而ERD15与CmERF3互作较弱；STPP基因与CmERF3在烟草BiFC实验中也表现出互作。以上的研究结果为进一步研究菊花CmERF3功能及其与互作蛋白的作用机制奠定了基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法3
1.1 实验药品与供试菌株3
1.2 实验方法3
1.2.1酵母双杂交筛选3
1.2.1.1 酵母cDNA文库筛选3
1.2.1.2 互作蛋白的分离鉴定3
1.2.1.3 互作蛋白的测序及对比分析4
1.2.2 互作蛋白验证4
1.2.2.1 酵母双杂交验证4
1.2.2.2 双分子荧光蛋白互补实验（BiFC）验证4
2 结果与分析4
2.1 酵母双杂交筛选获得互作蛋白4
2.2 酵母双杂交验证蛋白互作关系6
2.3 烟草双分子荧光互补（BiFC）验证蛋白互作7
3 讨论8
致谢9
参考文献9
附录A 实验所用试剂配方10
菊花基因CmERF3互作蛋白的筛选及验证

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