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菊花乙烯信号转录因子cmeil2的克隆和表达分析 【字数:7992】

2024-11-03 13:06编辑: www.jxszl.com景先生毕设
本文以拟南芥AtEIN3蛋白序列为检索序列,在菊花(Chrysanthemum morifolium)‘神马’转录组数据库中进行Blast分析,获得一个同源性较高的基因,在转录组库中被注释为CmEIL2。以该基因序列设计引物,从菊花‘神马’中克隆到该基因的开放阅读框(ORF)为1662 bp,编码553个氨基酸残基,蛋白分子量为55.4 kDa,理论等电点为5.12。蛋白结构分析表明,CmEIL2蛋白含有一个保守的EIN3结构域,属于EIN3/EIL家族成员,且其N端与拟南芥EIN3/EIL 家族基因的N 端保守性较高。CmEIL2蛋白为非跨膜蛋白,含有45个磷酸化位点,其二级结构中的无规则卷曲数量最多。植物组织定量结果表明,该基因在营养生长时期的叶片和生殖生长时期的舌状花中的表达量最高。外源乙烯利及乙烯抑制剂(1-MCP)处理实验表明,CmEIL2在转录水平可能不受乙烯及1-MCP的影响。这些研究结果为后续进一步研究菊花CmEIL2基因的功能奠定基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1材料与试剂2
1.2 植物总RNA 的提取2
1.3去基因组DNA及第一链cDNA合成3
1.4 菊花CmEIL2基因克隆3
1.5 菊花CmEIL2基因生物信息学分析3
1.6 菊花CmEIL2基因表达模式分析4
1.6.1 组织定量分析4
1.6.2 乙烯响应表达模式分析4
2 结果与分析5
2.1 菊花CmEIL2基因克隆5
2.2 菊花CmEIL2基因生物信息学分析5 2.2.1 CmEIL2序列的结构域5
2.2.2 CmEIL2与拟南芥EIN3/EIL基因家族N端氨基酸多序列比对分析5
2.2.3亚细胞定位预测与蛋白理化性质分析6
2.2.4 蛋白序列分析6
2.2.5 CmEIL2与拟南芥EIN3/EIL基因家族系统进化树分析8
2.3 菊花CmEIL2基因表达模式分析8
2.3. *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: #351916072
1 组织定量分析结果8
2.3.2乙烯响应表达模式分析结果9
3 讨论 10
致谢11
参考文献11
附录A12
附录B12
附录C13
附录D13
菊花乙烯信号转录因子CmEIL2的克隆和表达分析

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