目录
摘要1
关键词1
Abstract2
Key words2
引言3
1 材料与方法4
材料4
1.1.1 实验材料4
1.1.2 实验器材4
1.2 方法4
1.2.1 CRISPR/Cas9载体的构建4
1.2.2 草莓的转化6
1.2.3 用CTAB法提取草莓叶片DNA6
1.2.4 用核酸蛋白测定仪检测DNA浓度6
1.2.5 PCR6
1.2.6 琼脂糖凝胶电泳检测7
1.2.7 高通量测序及分析7
2 结果与分析7
2.1 目标基因PCR片段扩增7
2.2 高通量测序鉴定CRISPR/Cas9基因编辑草莓植株 9
3 讨论11
致谢13
参考文献14
图11 农杆菌介导的草莓遗传转化4
图12 单子叶和双子叶植物的一个CRISPR/Cas9系统5
表21 DNA浓度及PCR鉴定结果8
表22 基因1CRISPR/Cas9基因编辑结果9
表23 基因2CRISPR/Cas9基因编辑结果10
表24 基因3CRISPR/Cas9基因编辑结果11
森林草莓CRISPR/Cas9基因编辑技术应用
摘要
CRISPR/Cas9技术是自2013年来兴起的一种便捷高效的基因编辑技术，利用它可以获得生物体基因功能缺失的表型。森林草莓为二倍体，是栽培种草莓的一个祖先种。它植株小，易于转化，且具有高质量的基因组序列。所以森林草莓是栽培草莓和蔷薇科植物的理想模式植物。突变体材料的获得是基因功能研究的基础和关键，利用基因编辑技术可促进目标基因突变和实现定向育种。我们以森林草莓植株作为材料，利用CRISPR/Cas9技术编辑目标基因，用PCR和高通量测序的方法验证突变位点并获得突变体。通过高通量测序分析发现，三个目标基因中有两个基因被编辑、一个基因未见明显编辑。由此，我们用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得的突变体为后 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072* 
续的基因功能研究提供了可靠的实验材料。

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